畜牧兽医学报

作者：刘福康, 袁莉刚, 张达, 汤傲星, 刘光清, 朱杰

单位：1. 甘肃农业大学动物医学院, 兰州 730070；2. 中国农业科学院上海兽医研究所, 上海 200241

关键词：猫传染性腹膜炎病毒,猫冠状病毒,N蛋白,基因克隆,原核表达,多克隆抗体

基金：上海市市级科技重大专项(ZD2021CY001);上海市自然科学基金项目(22ZR1476300)

本研究旨在体外原核表达猫传染性腹膜炎病毒(feline infectious peritonitis virus, FIPV)SH2021株核衣壳蛋白(nucleocapsid, N)，制备兔源多克隆抗体。根据FIPV SH2021株N基因序列设计引物，构建pCold-I-N重组表达质粒。随后，将重组质粒转化至表达感受态细胞BL21(DE3)，在终浓度为1.0 mmol·L-1的IPTG和16 ℃的诱导条件下进行表达。最后，利用His层析柱进行纯化，纯化后的重组蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体。结果表明，纯化获得重组N蛋白大小约为45 ku，制备的N蛋白兔多克隆抗体效价可达1∶512 000，该抗体对N蛋白具有良好的反应原性。本研究成功所制备了FIPV N蛋白兔多克隆抗体，该抗体具有良好的反应原性和特异性，为FIPV抗原抗体检测以及研究N蛋白生物学功能研究提供重要工具。

来源：2024年第10期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

查看畜牧兽医学报杂志2024年第10期