畜牧兽医学报

作者：张红强, 任善会, 姚威, 龚真莉, 杨雪, 马春玲, 尤婷, 张玉哲, 柳民意, 钱文洁, 李柳杨, 余志鹏, 孙跃峰, 陈豪泰, 樊江峰

单位：1. 甘肃农业大学动物医学院, 兰州 730070；2. 中国农业科学院兰州兽医研究所, 兰州 730046；3. 重庆市万州区畜牧产业发展中心, 重庆 404100

关键词：山羊痘病毒,GPCR,荧光定量PCR

基金：国家自然科学基金(32302850);甘肃省科技计划资助(22JR5RA035);lanmu(bianhao);中国农业科学院兰州兽医研究所基本科研业务费(1610312021008)

基于山羊痘病毒(goat pox virus, GTPV)的基因组序列，建立靶向G蛋白偶联趋化因子受体(G-protein-coupled chemokine receptor，GPCR)基因的荧光定量PCR检测方法。基于GTPV全基因序列设计6对qPCR引物，并进行特异性和灵敏性的筛选和检测，最终筛选得到1对高特异性和灵敏性的荧光定量PCR引物；根据GTPV/AV41疫苗株GPCR基因序列，设计普通PCR引物，扩增GPCR基因，构建真核表达载体，建立荧光定量PCR标准曲线。结果表明：筛选得到1对靶向于GPCR基因的特异性qPCR引物；构建pCAGGS-GPCR真核表达质粒，建立标准曲线y=-3.5289x+49.07，线性相关系数R2=0.997 2，扩增效率为92.7%；验证性试验结果显示，该引物最低检测限为2.0拷贝·μL-1，各批次内与批次间重复性结果的变异系数均小于2%，表明其具有特异性强、重复性好和灵敏度高的优点。建立了靶向山羊痘病毒GPCR基因的qPCR检测方法，为防控山羊痘提供了高效的检测手段。

来源：2024年第10期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

查看畜牧兽医学报杂志2024年第10期