畜牧兽医学报

作者：袁紫金, 王婉昕, 邢娅, 李家惠, 薛颖, 葛晶, 赵敏孟, 刘龙, 龚道清, 耿拓宇

单位：扬州大学动物科学与技术学院，扬州 225009

关键词：鹅,肥肝,HDLBP,线粒体,氧化应激,炎症

基金：国家自然科学基金(32172717);国家自然科学基金青年基金(32302754);中国博士后面上项目(2023M742960)

旨在利用活体与细胞模型探究高密度脂蛋白结合蛋白(HDLBP)的亚细胞分布、基因功能及其与鹅肥肝形成的关系。本研究选取70日龄健康朗德鹅公鹅14只，单笼饲养，随机均分为对照组(平均体重为3.71 kg，自由采食)和试验组(平均体重为3.72 kg，填饲20 d)进行活体模型试验。从23日龄朗德鹅胚胎中分离肝细胞并过表达HDLBP基因进行细胞模型试验。首先采用免疫印迹法、免疫荧光技术对鹅原代肝细胞中HDLBP蛋白质进行亚细胞定位分析，其次采用免疫印迹法检测填饲鹅和对照鹅肝脏全细胞HDLBP(wHDLBP)及线粒体中HDLBP(mHDLBP)的蛋白质丰度，然后在鹅原代肝细胞中过表达HDLBP，检测其对细胞中mHDLBP蛋白质丰度、丙二醛(MDA)含量、总超氧化物歧化酶(T-SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性、活性氧类物质(ROS)和线粒体膜电位水平的影响，最后通过转录组测序分析筛选HDLBP过表达影响的差异表达基因与相关信号通路，并在活体模型中对部分差异表达基因进行定量PCR验证。结果表明：HDLBP可结合到线粒体中；填饲组wHDLBP和mHDLBP蛋白质丰度均显著低于对照组(P < 0.01)；在鹅原代肝细胞中过表达HDLBP显著增加mHDLBP的蛋白质丰度(P < 0.05)，增加MDA(P < 0.01)和ROS(P < 0.05)含量，降低线粒体膜电位(P < 0.05)及T-SOD(P < 0.05)和GSH-PX(P < 0.05)活性；HDLBP过表达所影响的上调差异表达基因主要富集于免疫/炎症相关通路。此外，相对于对照组，填饲组中炎症相关基因IL1R1、TNFSF10、LTC4S、NCF1、SFTPA1及KDR的表达可能受到HDLBP的调控而显著减少(P < 0.05，0.01或0.001)。HDLBP能够与线粒体结合，填饲显著降低鹅肝全细胞和线粒体样中HDLBP的蛋白水平，过表达HDLBP导致线粒体功能损伤、氧化应激和炎性因子的表达增强，因此HDLBP可能通过影响线粒体功能、调控氧化应激和炎症反应为鹅肥肝提供保护。

来源：2024年第9期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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