畜牧兽医学报

作者：廖焕程, 石正旺, 罗俊聪, 王婉莹, 冯露, 周静, 张帆, 石鑫泰, 田宏

单位：中国农业科学院兰州兽医研究所 兰州大学动物医学与生物安全学院 动物疫病防控全国重点实验室，兰州 730000

关键词：O型口蹄疫病毒,Cathay拓扑型,杂交瘤细胞,单克隆抗体,ELISA

基金：2022甘肃省创新联合体-家畜重要疫病诊断研制与产业化(22ZD6NA012);国家重点研发计划项目(2021YFD1800300);中央高校基本科研业务费专项资金资助;国家生猪技术创新中心(NCTIP-XD/C03);中国农业科学院创新计划(CAAS-CSLPDC-202302);2023农业技术产业体系建设(CARS-35);甘肃省科技重大专项计划(22ZD6NA001)

本研究旨在纯化O型口蹄疫Cathay拓扑型病毒抗原，并制备单克隆抗体，为口蹄疫新型Cathay毒株的研究提供生物材料。PEG沉淀法纯化O型口蹄疫Cathay毒株抗原，免疫BALB/c小鼠，取脾细胞与SP2/0细胞融合制备杂交瘤细胞，用间接ELISA方法筛选阳性细胞，有限稀释法进行亚克隆，获得2株能够稳定分泌特异性针对O型口蹄疫Cathay株病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞，分别命名为10E6与11C7。叠加试验表明，两株单抗的叠加率为49.45%，识别不同的抗原表位。间接ELISA和IFA试验显示，两株单抗与O型口蹄疫Cathay株病毒具有良好的反应性。单抗特异性检测结果表明，2株单抗均能特异性识别Cathay株口蹄疫病毒，不与其他口蹄疫病毒毒株交叉反应。抗体亚型鉴定结果显示，10E6单抗的轻链为Kappa链，11C7单抗的轻链为Lamda链，两株单抗重链类型均为IgG2a。结果表明，本研究成功制备了两株特异性结合O型口蹄疫Cathay拓扑型病毒的单克隆抗体，两株单抗均具有良好的反应性与特异性。应用两株单抗建立O型口蹄疫Cathay病毒的双抗体夹心ELISA检测方法，该ELISA检测方法特异性、重复性和敏感性良好，为O型口蹄疫Cathay毒株的快速诊断防控与研究建立了基础。

来源：2024年第9期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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