国内刊号:11-1985/S
国际刊号:0366-6964
发布日期:
作者:付艺乾, 梁东阁, 王铭洋, 潘佳佳, 杨彦宾, 曾磊, 康相涛
单位:1. 河南农业大学动物医学院,郑州 450046;2. 河南农业大学,农业农村部动物生化与营养重点实验室,郑州 450046;3. 河南农业大学,河南省动物生长发育调控重点实验室,郑州 450046;4. 河南农业大学动物科技学院,郑州 450046
关键词:shRNA,干扰素调节因子,猪伪狂犬病病毒,细胞炎性因子
基金:河南农业大学博士启动基金资助项目(30501221);河南省高等教育教学改革研究与实践项目(2021SJGLX351)
旨在揭示干扰素调节因子(interferon regulatory factor,IRFs)对猪伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)增殖的影响,本研究通过shRNA技术构建敲减IRF1-9的PK15细胞系,并检测其敲减效率。采用流式细胞术以及滴度测定检测敲减IRF1-9后PRV的增殖情况;利用RT-qPCR技术检测PRV感染细胞后PRV-gB、IFN-β、ISG-15和IL-6的mRNA表达水平;Western blot技术检测PRV感染细胞后gB蛋白的表达水平。敲减效率测定结果显示,PK15细胞中的IRF1-9 mRNA表达水平均有显著降低;流式细胞术及滴度测定结果表明,敲减IRF1-9基因后有助于PRV的增殖;RT-qPCR及Western blot结果证明,敲减IRF1-9基因后,PRV-gB mRNA及蛋白表达水平均有显著提高;细胞炎性因子的mRNA表达水平检测结果发现,敲减IRF1-9抑制PRV诱导的IFN-β、ISG-15以及IL-6 mRNA表达。综上所述,IRF1-9是PRV在PK-15细胞内复制的宿主限制因子。
来源:2024年第9期
《畜牧兽医学报》期刊编辑部