畜牧兽医学报

作者：王怡, 高娟, 胡悦旻, 杨跃飞, 范博钧, 鞠辉明

单位：1. 扬州大学广陵学院，扬州 225000；2. 扬州大学兽医学院/江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心，扬州 225009

关键词：猪,自噬,SMSCs,血清饥饿胁迫,AMPK/mTOR通路

基金：江苏省自然科学基金项目(BK20201224);国家自然科学基金(31872323);江苏高校优势学科建设工程项目(PAPD2018)

旨在研究短期饥饿胁迫对猪骨骼肌卫星细胞(skeletal muscle satellite cells，SMSCs)代谢及自噬发生的影响，解析自噬机制在骨骼肌发育调控网络中的地位和作用，为改良家猪产肉性状提供理论依据。将本实验室分离并保存的SMSCs细胞系复苏，按培养体系中血清浓度将细胞分为20%血清组(对照组)、15%血清组、10%血清组、5%血清组和0%血清组，以形成不同程度的饥饿胁迫。当细胞融合度达到70%~80%后再培养24 h进行检测，每组4个重复。流式细胞术检测各组细胞凋亡率、膜电位和活性氧水平；试剂盒测定ATP水平；WB检测自噬标志蛋白LC3B-Ⅱ、p62和通路相关蛋白AMPK、mTOR的表达；透射电镜检测细胞线粒体形态和细胞器的变化。结果显示，随着细胞中血清浓度降低，细胞活力、p62蛋白量、p-mTOR/mTOR比值逐渐降低；细胞凋亡率、ROS水平、ATP水平、LC3B-Ⅱ蛋白水平、p-AMPK/AMPK比值、细胞内自噬溶酶体数量、细胞核及线粒体异常率则逐渐升高；与对照组相比，15%组膜电位显著升高，5%和0%组极显著降低。这表明，短期血清饥饿胁迫能诱导基于AMPK/mTOR信号通路的自噬发生，加快细胞代谢，但同时存在加快细胞凋亡、抑制细胞增殖等毒副作用。

来源：2024年第8期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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