畜牧兽医学报

作者：曹馨予, 蔡佳炜, 鲍志远, 姚漱玉, 李云鹏, 陈阳, 吴信生, 赵博昊

单位：扬州大学动物科学与技术学院，扬州 225009

关键词：ATG14,自噬,毛囊,家兔,毛乳头细胞

基金：国家自然科学基金(32072724);国家自然科学基金(32102529);财政部和农业农村部: 国家现代农业产业技术体系资助(CARS-43-A-1);扬州大学大学生科创基金(XCX20230720)

旨在探究自噬相关蛋白14(autophagy-related protein 14，ATG14)调控家兔毛囊毛乳头细胞(dermal papilla cells，DPCs)自噬进程对毛囊发育生长的影响。本试验选取健康6月龄长毛兔，采集背部皮肤分离培养DPCs，通过克隆ATG14基因的编码序列(coding sequence，CDS)，利用生物信息学对ATG14的生物学特性进行初步分析，在家兔DPCs中过表达或敲减ATG14对自噬相关蛋白和毛囊生长发育相关基因的表达及DPCs增殖水平的影响进行探究。结果表明，ATG14基因CDS长度为1 479 bp，共编码492个氨基酸，不存在潜在信号肽及跨膜区，属于定位于细胞核的不稳定蛋白，在不同哺乳动物中存在同源性。家兔DPCs中过表达或敲减ATG14后，WB结果显示ATG14能够上调自噬标志蛋白LC3和Beclin1的蛋白表达，抑制自噬抑制蛋白P62表达水平。ATG14能够增加细胞中pEGFP-LC3B荧光表达，表明ATG14能够激活细胞中LC3B的表达。同时，在DPCs中过表达ATG14能够显著上调CCND1、FGF2、LEF1、BCL2和WNT2的mRNA表达水平，显著下调SFRP2和TGFβ-1的基因表达水平(P < 0.05)，敲减ATG14能够显著下调CCND1、FGF2、LEF1、BCL2和WNT2的基因表达水平，显著上调SFRP2和TGFβ-1的mRNA水平(P < 0.05)。ATG14能够上调LEF1和CCND1的蛋白表达水平。此外，DPC中过表达ATG14能够显著促进DPCs细胞增殖(P < 0.01)。本研究通过对家兔ATG14基因调控DPCs自噬进程的功能进行分析，为阐明家兔毛囊生长发育的调控机制提供理论依据。

来源：2024年第8期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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