畜牧兽医学报

作者：李亚楠, 马天文, 马玉辉, 魏成威

单位：1. 东北农业大学动物医学学院，黑龙江省动物疾病致病机制与比较医学重点实验室，哈尔滨 150030；2. 新疆伊犁哈萨克自治州昭苏县畜牧兽医发展中心，昭苏 835500

关键词：软骨细胞,炎性损伤,白果内酯,AMPK-SIRT3正反馈环路,线粒体生物发生

基金：中国博士后科学基金项目(2023TQ0053);黑龙江省自然科学基金项目(LH2023C025);黑龙江省自然科学基金项目(YQ2023C015)

旨在以AMPK-SIRT3正反馈环路为切入点，探讨白果内酯改善白介素1β(IL-1β)诱导的ATDC5软骨细胞炎性损伤的作用机制。采用IL-1β(10 ng·mL-1)诱导ATDC5软骨细胞炎性损伤来构建体外骨关节炎模型，随机分为对照组，IL-1β组，IL-1β和白果内酯共同处理组，其中, 共同处理组按照白果内酯的应用浓度又分为低、中和高(15、30和60 μmol·L-1)3个不同剂量组。免疫印迹法(Western blot)和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法检测各组软骨细胞中ADAMTS4、PGC-1a、Collagen Type Ⅱ、MMP-3、NRF-1和Fis1的蛋白与mRNA表达情况。试剂盒检测各组ATP含量，并通过免疫荧光方法检测SIRT3表达水平。Western blot检测AMPK-SIRT3正反馈环路相关蛋白p-AMPK、AMPK和SIRT3表达水平。使用Compound C和3-TYP处理ATDC5软骨细胞，构建AMPK-SIRT3信号通路阻断模型，检测下游PGC-1a、NRF-1和Fis1蛋白变化。结果显示，白果内酯通过下调ADAMTS4和MMP-3表达(P < 0.05)，促进Type Ⅱ collagen表达(P < 0.05)来调节ECM代谢平衡，并促进ATP合成。在机制上，白果内酯干预软骨细胞后p-AMPK、SITR3、PGC-1a和NRF-1水平显著升高(P < 0.05)，而Fis1蛋白水平显著降低(P < 0.05)，并且使用Compound C和3-TYP预处理软骨细胞后, PGC-1a、NRF-1和Fis1蛋白水平被不同程度抑制。综上所述，白果内酯通过AMPK-SIRT3正反馈环路激活PGC-1a，调节线粒体生物发生改善ATDC5软骨细胞炎性损伤。

来源：2024年第8期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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