畜牧兽医学报

北大核心,CA,JST,CSCD,WJCI

国内刊号:11-1985/S

国际刊号:0366-6964

畜牧兽医学报杂志2024年第7期:一株猪流行性腹泻病毒强毒株的分离与鉴定

发布日期:

作者:刘维哲, 罗成刚, 袁蓉, 廖艺杰, 文艺悯, 孙莹, 俞恩波, 曹三杰, 黄小波

单位:1. 四川农业大学动物医学院猪病研究中心,成都 611130;2. 农业农村部兽用药物与兽医诊断技术四川科学观测实验站,成都 611130;3. 成都市畜禽遗传资源保护中心,成都 610081

关键词:猪流行性腹泻病毒,分离,鉴定,序列分析,哺乳仔猪,致病性

基金:四川省“十四五”川猪重大科技专项(2021ZDZX0010);成华猪保护基地生物危害防控经费项目(ZZSS-2024-193);云南省重大科技专项计划(202102AE090039);四川省产教融合示范项目“饲料工业全产业链转型升级产教融合创新示范”

为了掌握猪流行性腹泻病毒(PEDV)最新流行毒株的病原特征与致病性,开展了PEDV的分离与鉴定。将PEDV阳性病料样品接种Vero细胞连续盲传,分离PEDV流行毒株,并开展了分离毒株的培养特性、全基因组序列分析和仔猪致病性评价。结果显示:传至第3代(P3)分离出一株病毒,病毒在细胞上形成典型的“合胞体”样病变;电镜下病毒大小60~110 nm;P10到P35代滴度从104.7 TCID50 ·mL-1升至106.43 TCID50 ·mL-1;CHN-SC2021(P5)基因组全长28 014 bp(GenBank收录号:OM505025.1),与中国地区、欧美地区、亚洲其他国家毒株的相似性分别为99.16%~96.32%、99.01%~96.57%、98.94%~96.33%;系统进化树显示CHN-SC2021株与江西CH/JXJA/2017 (MF375374.1)、河南CH/HNAY/2015 (KT199103.1)、CH/HNKF-16 (KY649107.1)毒株亲缘关系较近,属于GⅡ a型毒株。S基因序列与参考毒株相似度在98.7%~93.4%。将CHN-SC2021病毒液以每头3 mL 105 TCID50 ·mL-1的剂量口服感染6日龄哺乳仔猪,12 h开始出现食欲不振,20 h时呕吐,24 h出现剧烈呕吐和黄色水样腹泻;剖检病变主要是胃肠臌气、空肠和回肠透明;组织病变显示各肠段均有不同程度的肠绒毛病变、脱落、结缔组织疏松、黏膜肌层与肌层间距增宽等;免疫组化结果显示小肠各段均有病毒,回肠中病毒最多。本研究分离获得一株GⅡ a型的PEDV强毒株,有助于丰富我国PEDV的流行毒株信息及为临床防控提供参考。

来源:2024年第7期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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