畜牧兽医学报

作者：班玛王清, 陈曦, 岳怡, 苏玉蓉, 岳华, 汤承

单位：1. 西南民族大学畜牧兽医学院，成都 610041；2. 四川省阿坝州动物疫病预防控制中心，阿坝州 624011

关键词：牛呼吸道冠状病毒,S基因,HE基因,小鼠,致病性

基金：西南民族大学“双一流”项目资助(XM2023014);“十四五”国家重点研发计划课题(2021YFD1600203)

牛冠状病毒(bovine coronavirus, BCoV)是引起牛呼吸道疾病和消化道疾病的重要病原之一。本研究旨在分离牛呼吸道冠状病毒(BRCV)并研究其部分生物学特性。采集暴发呼吸道疾病的肉牛鼻拭子，经荧光定量PCR鉴定为BCoV阳性。将阳性样本接种人盲肠腺癌细胞(HCT-8)，分离纯化后，对引起细胞病变的病毒分离株的S和HE基因进行序列测定和系统发育分析，并将病毒分离株接种BALB/c小鼠进行致病性研究。结果显示，成功分离到1株致细胞病变的毒株，经荧光定量PCR、间接免疫荧光和电镜观察鉴定为BRCV，蚀斑纯化后计算病毒TCID50为10-8.46·0.1 mL-1。S基因和HE基因序列分析表明两种基因均发生重组事件；S蛋白具有2个独特的氨基酸突变(A33G和A975V)，分别位于S1亚基的受体结合域和S2亚基；HE基因具有2个独特的氨基酸突变(L235R和L365F)，分别位于凝集素域和近膜端域。分离株对4周龄BALB/c小鼠具有较强的致病性，能够引起小鼠呼吸加快和腹泻等临床症状，剖检和组织病理学显示肺和肠道出血，病毒主要分布在肺和肠组织，以肺组织中病毒载量最高。本研究首次在国内肉牛中分离到1株BRCV，S和HE基因分子有独特氨基酸突变，成功建立了小鼠感染模型，为进一步研究BCoV的生物学特性和遗传进化提供了参考。

来源：2024年第7期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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