畜牧兽医学报

作者：朱明德, 陈奕静, 戴鹏秀, 张翊华, 张欣珂

单位：西北农林科技大学动物医学院 兽医外科实验室，杨凌 712100

关键词：糖尿病,犬脂肪间充质干细胞,胰岛素分泌细胞,Hnf1b基因,多基因共表达

基金：2023年动物防疫专项-低免疫原性新生胰(K3031223086);金福莱恩防治跳蚤、蜱感染的临床验证试验项目(K4020121004)

本研究旨在利用转基因技术诱导脂肪间充质干细胞(adipose-derived mesenchymal stem cells, AMSCs)分化为胰岛素分泌细胞(insulin producing cells, IPCs)，通过干细胞疗法达到临床治疗糖尿病的目的。本试验首先验证了Hnf1b基因在体外诱导犬AMSCs向IPCs分化中的作用，在此基础上联合胰岛细胞发育过程中起关键作用的级联调控因子Pdx1、Ngn3、Pax4、Nkx6.1，组成三种不同的多基因共表达腺病毒感染犬AMSCs，重编程其向IPCs分化，通过检测筛选出最佳诱导组合。结果表明，Hnf1b基因对体外诱导犬AMSCs向IPCs分化具有促进作用。pAdEasy-Hnf1b-Pdx1-Ngn3(A)、pAdEasy-Hnf1b-Pdx1-Ngn3-Pax4(B)、pAdEasy-Hnf1b-Pdx1-Ngn3-Nkx6.1(C)三种组合的多基因共表达腺病毒载体，在感染犬AMSCs 25 d后，A、B、C三组均形成胰岛样细胞团，且B组数量最多，双硫腙染色着色最深；高糖刺激下B组的胰岛素分泌量极显著高于A组和C组。A、B、C三组的胰岛细胞发育相关基因表达量显著升高；B组Pdx1基因的表达量显著高于A组和C组，Pcsk1基因表达量极显著高于C组；Ins基因的表达量显著高于A组。综上所述，Hnf1b基因对体外诱导犬AMSCs向IPCs分化具有促进作用，Hnf1b、Pdx1、Ngn3和Pax4基因联合诱导效率最佳。该研究结果为探究干细胞向IPCs分化的更高效方法提供新参考，也为糖尿病的临床治疗提供新思路。

来源：2024年第7期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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