畜牧兽医学报

作者：南岳, 龙美贞, 王元智, 刘一朵, 周向梅

单位：中国农业大学动物医学院 兽医公共卫生安全全国重点实验室, 北京 100193

关键词：副结核分枝杆菌,重组酶介导扩增,侧向流试纸条

基金：“十四五”重点研发计划(2022YFD1800703)

旨在建立一种副结核分枝杆菌(Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis，MAP)精准快速的检测方法，结合重组酶介导扩增(recombinase-aid amplification, RAA)和侧向流试纸条(lateral flow dipstick, LFD)技术，以MAP的特异性多拷贝插入元件IS900设计引物和探针，通过优化反应时间和温度等条件，建立可用于MAP现场可视化检测的RAA-LFD方法。该检测方法在35 ℃条件下恒温反应30 min即可实现对MAP目的基因的有效扩增。试验结果显示：该方法可特异性地检测出MAP，不与其他常见的病原发生交叉反应；对MAP标准品的最低检测限可达到10 fg·μL-1；使用该方法对149份牛奶样品进行检测，与传统的PCR相比，其敏感性为100%。综上，本研究成功建立了一种针对于MAP的精准快速的试纸条检测方法，并具有广泛的应用前景。

来源：2024年第7期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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