畜牧兽医学报

作者：刘畅, 郝科兴, 陈岩, 曾维斌, 喻恒彬, 陈磊, 王静, 胡广东

单位：石河子大学动物科技学院, 石河子 832003

关键词：绵羊,滋养层细胞,PPARγ,干扰

基金：国家自然科学基金(32060751);兵团重点领域科技攻关计划项目(2021AB014);石河子大学高层次人才科研启动资金专项项目(RCZK201941)

旨在通过干扰PPARγ基因的表达，探究PPARγ对绵羊滋养层细胞增殖活性、细胞凋亡、细胞迁移率以及脂质累积的影响，为深入研究PPARγ在绵羊滋养层细胞中的分子机制提供基础依据。本研究设计并合成干扰PPARγ基因的siRNA干扰片段，通过Western Blot和RT-qPCR筛选干扰效率最高的siRNA，并转染至分离培养的绵羊滋养层细胞中。通过BODIPY染色检测干扰PPARγ基因后滋养层细胞中脂滴的聚积，比色法检测细胞中甘油三酯的含量，并利用RT-qPCR检测脂代谢相关基因的转录水平。采用CCK-8法、划痕试验和流式细胞法，分别探究干扰PPARγ基因对滋养层细胞增殖活性、细胞迁移率及细胞凋亡的影响。筛选得到了干扰效率最高的siPPARγ-1片段用于转染滋养层细胞，在干扰滋养层细胞PPARγ基因表达后，细胞中脂滴聚积能力下降，甘油三酯含量降低(P＜0.01)，脂代谢相关基因CD36、FABP4和PLIN2的转录水平也受到抑制(P＜0.01)。同时，滋养层细胞的增殖活力也显著降低(P＜0.05)，细胞迁移率减少(P＜0.01)，而细胞凋亡率显著上升(P＜0.01)。本研究表明PPARγ基因在调控滋养层细胞功能方面起重要作用，可对其具体分子机制进行深入研究，以期用于繁殖育种实践中。

来源：2024年第6期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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