畜牧兽医学报

作者：陈浩, 郝哥, 蒲家艳, 肖洁, 熊常明, 何维, 朱煜华, 许力文, 姜庆, 杨光友

单位：1. 四川农业大学动物医学院, 成都 611130；2. 雅安职业技术学院, 雅安 625014

关键词：肠艾美耳球虫,微线蛋白2,兔,免疫保护

基金：四川省雅安市重点研发项目(23ZDYF0004)

本研究旨在评价肠艾美耳球虫重组微线蛋白2(rEiMIC2)对兔的免疫保护效果，为肠艾美耳球虫重组亚单位疫苗的研究提供参考。在肠艾美耳球虫转录组数据中筛选出EiMIC2基因，进行克隆、原核表达和蛋白纯化，并采用免疫印迹检测重组蛋白的免疫反应性。将35日龄无球虫新西兰幼兔32只随机分为4组(未免疫未攻虫组、未免疫攻虫组、pET-32a(+)载体组和rEiMIC2免疫组)，每组8只，未免疫未攻虫组和未免疫攻虫组每只颈部皮下注射1 mL无菌PBS，pET-32a(+)载体组和rEiMIC2免疫组每只分别接种100 μg pET-32a(+)载体蛋白、rEiMIC2，首免后2周进行二免。二免14 d后，除去未免疫未攻虫组，其余3组每只新西兰兔口服接种5×104个肠艾美耳球虫孢子化卵囊；攻虫14 d后安乐死所有新西兰兔。重组蛋白免疫兔后通过观察临床症状、肠道病变、测定兔的相对增重率、卵囊减少率、抗球虫指数(ACI)值和料肉比以及检测血清中特异性IgG、IL-2、IL-4、IL-10、IFN-γ综合评价rEiMIC2的免疫保护效果。结果显示，EiMIC2基因开放阅读框长度为1 605 bp，编码的蛋白分子质量约为57.68 ku。免疫印迹显示rEiMIC2能够被阳性血清所识别，表明其具有良好的免疫反应性。免疫保护试验显示：攻虫后各组幼兔陆续出现精神沉郁和腹泻的症状，未免疫攻虫组和rEiMIC2免疫组各有1只兔死亡；rEiMIC2免疫组相对增重率为73.97%，卵囊减少率为69.98%，ACI值为136.97，料肉比为3.98∶1，与未免疫攻虫组差异显著(P < 0.05)；rEiMIC2免疫组肠道病变与未免疫攻虫组相比较轻，血清中特异性IgG水平显著高于未免疫攻虫组(P < 0.05)。综上，rEiMIC2免疫兔后，能有效减少卵囊排出和增重损失，减轻肠道损伤，具有一定的保护效果。

来源：2024年第6期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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