畜牧兽医学报

作者：董书餐, 毛帅翔, 伍翠莹, 李耀坤, 孙宝丽, 郭勇庆, 邓铭, 刘德武, 柳广斌

单位：华南农业大学动物科学学院, 广州 510642

关键词：山羊,颗粒细胞,AR,恩杂鲁胺,增殖凋亡

基金：广东省林业科技创新项目(2023KJCX004)；广东省南方现代草牧业(羊)创新团队(2023KJ127)；广东省农业农村厅项目(2022-XPY-00-009)；韶关市仁化县牛羊产业园项目(GDSCYY2021-018)

旨在通过使用恩杂鲁胺探究雄激素受体(AR)对山羊卵泡颗粒细胞增殖凋亡的影响。本研究首先对山羊卵泡颗粒细胞进行体外分离培养，然后利用显微镜观察和CCK8探究颗粒细胞的恩杂鲁胺适合培养浓度；之后将试验分为3个组，即空白对照组(不做处理)、阴性对照组(DMSO处理)和试验组(恩杂鲁胺处理)，每个组均设置3个重复；然后利用EDU检测颗粒细胞的增殖情况，使用Caspase3活性与细胞凋亡检测试剂盒检测颗粒细胞的凋亡情况，并利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹(Western blot)检测颗粒细胞增殖凋亡相关基因和蛋白的表达情况。结果表明，AR抑制剂恩杂鲁胺能够显著地抑制颗粒细胞的增殖和降低颗粒细胞中CCND1、PCNA和MKI67基因的mRNA水平，并且还能够显著抑制CCND1、PCNA和β-catenin蛋白的表达；此外，恩杂鲁胺还能够促进山羊卵泡颗粒细胞的凋亡，显著提高山羊卵泡颗粒细胞中BAX和BCL2的mRNA水平，但不影响BAX和BCL2的蛋白表达，另外恩杂鲁胺虽然没有影响CASP3基因的mRNA水平但能够提高Caspase 3的活性。这些结果表明，恩杂鲁胺抑制AR活性后能够影响颗粒细胞中β-catenin、PCNA、CCND1、Caspase 3等的表达，参与调控颗粒细胞的增殖凋亡。

来源：2024年第5期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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