畜牧兽医学报

作者：高洁, 李晓成, 穆杨, 张慧, 魏荣, 李劼

单位：1. 西北农林科技大学动物医学院预防兽医系, 杨凌 712100;2. 中国动物卫生与流行病学中心, 青岛 266032;3. 金宇保灵生物药品有限公司, 呼和浩特 010111

关键词：多杀性巴氏杆菌,外膜囊泡,生物学特性,疫苗

基金：国家重点研发计划(2021YFD1800300)

旨在探究荚膜B型多杀性巴氏杆菌外膜囊泡(outer membrane vesicles, OMVs)的生物学特性及免疫保护效果。本研究利用超高速离心和密度梯度离心方法提取荚膜B型多杀性巴氏杆菌的OMVs，通过透射电子显微镜(transmission electron microscope, TEM)观察OMVs的形态及大小，采用SDS-PAGE、LC-MS/MS分析OMVs主要蛋白，以蛋白定量试剂测定其蛋白浓度以及鲎试剂法测定其内毒素含量，然后以新西兰白兔为动物模型，开展免疫保护效果评价。结果显示，荚膜B型多杀性巴氏杆菌的OMVs呈完整规则的球形结构，平均粒径108.3 nm，其中的蛋白质主要集中在33、40、53 ku处，内毒素含量为3.31×106 EU·mL-1，用制备的OMVs以50 μg·只-1免疫新西兰白兔2次后，免疫兔血清抗体效价可达1∶405 600，外周血淋巴细胞IFN-γ和IL-4转录水平明显升高，对荚膜B型多杀性巴氏杆菌攻击的保护效率为75%。综上表明，荚膜B型多杀性巴氏杆菌的外膜囊泡具有良好的免疫保护效果，有作为候选疫苗的潜质，本研究为外膜囊泡疫苗的研究奠定了基础。

来源：2024年第5期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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