畜牧兽医学报

作者：王静, 张淑娟, 胡霞, 刘向阳, 张兴翠, 宋振辉

单位：1. 西南大学动物医学院, 重庆 402460;2. 新疆农业大学动物医学学院, 乌鲁木齐 830052

关键词：CD44,猪流行性腹泻病毒,钠氢交换体3,钠离子

基金：中央高校基本业务基金资助项目(XDJK2020RC001)；重庆市研究生科研创新项目(CYS19137)

本研究旨在研究CD44(cluster of differentiation 44)对感染猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)的猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)中钠氢交换体3(NHE3)表达及膜转移的影响。以IPEC-J2为细胞模型，采用RT-qPCR和Western blot检测感染PEDV后不同时间点IPEC-J2细胞中NHE3和PEDV N表达量变化；转染质粒调控IPEC-J2中CD44表达后，采用TCID50和Western blot检测PEDV感染后不同时间点PEDV复制水平和NHE3蛋白表达变化，采用火焰原子吸收法检测IPEC-J2细胞内外Na+浓度变化。转录组数据和细胞试验结果显示，与对照组相比，PEDV感染后IPEC-J2细胞中CD44蛋白表达水平和mRNA表达量均呈上调趋势，24～48 h内上升显著(P<0.05)，而PEDV N蛋白表达水平在12～48 h内则呈显著下降趋势(P<0.05)。此外，CD44重组质粒转染试验结果显示，与PEDV感染组相比，过表达CD44后感染PEDV组细胞中病毒滴度和PEDV N蛋白表达水平显著降低(P<0.05)，而干扰CD44后感染PEDV组细胞中病毒滴度和PEDV N蛋白表达水平则显著上升(P<0.05)。以上结果表明，高表达CD44具有抑制PEDV复制的作用，干扰CD44后PEDV复制增多。同时，为研究PEDV感染情况下，CD44是否参与了IPEC-J2细胞中NHE3表达的调节，采用Western blot和火焰原子吸收法检测了调节CD44后膜NHE3蛋白的表达水平和细胞内外Na+浓度。结果表明，过表达CD44显著促进了膜NHE3蛋白的表达和活性(P<0.05)，细胞内外Na+浓度逐渐恢复正常水平。相反，干扰CD44显著降低了膜NHE3蛋白的表达和活性(P<0.05)，细胞内外Na+浓度呈现失衡状态。结果提示，CD44可能是缓解PEDV引发仔猪腹泻的潜在治疗靶点，它通过抑制IPEC-J2细胞中PEDV的复制来增加转移至质膜上的NHE3数量，从而维持细胞内外Na+运转平衡。

来源：2024年第5期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

查看畜牧兽医学报杂志2024年第5期