国内刊号:11-1985/S
国际刊号:0366-6964
发布日期:
作者:马亚娟, 苏恺, 林依丹, 王亚文, 张亚楠, 袁洪兴, 袁晨, 宋勤叶
单位:1. 河北农业大学动物医学院, 保定 071000;2. 馆陶县农业农村局, 邯郸 057750
关键词:PEDVCV777毒株,Vero细胞,盐霉素,复制周期
基金:河北省自然科学基金-青年科学基金项目(C2022204136)
猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起的一种以水样腹泻、呕吐和脱水为主要特征的猪肠道传染病,给全球养猪业造成巨大的经济损失,但目前仍无有效的疫苗和治疗药物。盐霉素(salinomycin,SLM)是一种常用的抗生素,具有不易产生耐药性、排泄迅速、残留量极低的优点。为明确SLM对PEDV的抑制作用,首先通过TCID50 (tissue culture infective dose)检测PEDV在Vero细胞上的增殖规律,进一步经CCK-8试验和细胞病变效应(cytopathic effect,CPE)测定SLM的半数细胞毒性浓度(half-cytotoxic concentration,CC50)和其对PEDV的半数抑制浓度(median inhibition concentration,IC50),最后建立SLM、PEDV和Vero细胞的作用模型,利用RT-qPCR、免疫印迹(Western blot)和间接免疫荧光(indirect immunofluorescent assay,IFA)技术检测SLM对PEDV复制周期的影响。结果表明PEDV感染Vero细胞后24 h病毒滴度最高(107.7·0.1 mL-1);SLM对Vero细胞的CC50为7.698 μmol·L-1,对PEDV的IC50为1.617 μmol·L-1;随着SLM浓度的增加,PEDV滴度、N蛋白和N基因mRNA的表达量逐渐下降;SLM抑制PEDV的复制阶段,对病毒的吸附、入侵和释放阶段无明显影响。该研究结果可以为进一步挖掘PEDV抑制药物提供新思路。
来源:2024年第4期
《畜牧兽医学报》期刊编辑部