畜牧兽医学报

作者：马春玲, 任善会, 杨雪, 蔺玉刚, 李积雲, 王相伟, 殷相平, 孙跃峰, 万学瑞, 陈豪泰

单位：1. 中国农业科学院兰州兽医研究所, 兰州 730046;2. 甘肃农业大学, 兰州 730070;3. 塔里木大学, 阿拉尔 843300;4. 青海省科学技术信息研究所, 西宁 810003

关键词：牛结节性皮肤病病毒,ORF61,MGB探针,荧光定量PCR

基金：国家自然科学基金(32302850)；甘肃省科技计划资助(22JR5RA035)；甘肃省科技重大专项(22ZD6NA001)；中国农业科学院兰州兽医研究所基本科研业务费(1610312021008)

基于国内流行的牛结节性皮肤病病毒(lumpy skin disease virus, LSDV)的基因组序列，建立了靶向ORF61基因的MGB探针荧光定量PCR检测方法。本研究基于LSDV基因序列设计出带有MGB探针的特异性荧光定量PCR引物，并进行特异性和灵敏性筛选验证。最终，筛选得到靶向于LSDV ORF61基因的一对qPCR引物；利用pCAGGS-ORF61真核表达质粒，获得标准曲线y=-3.287 5x+47.87，线性相关系数R2=0.998 6，扩增效率达101%；荧光定量PCR特异性、重复性和灵敏性试验结果表明，该引物的特异性高、重复性良好和灵敏度高等优点；该引物的最低检测限为6.71拷贝·μL-1，各批次内与批次间重复性结果的变异系数均小于2%。以上结果表明，作者建立特异性LSDV的荧光定量PCR检测方法，为LSD预防和控制提供有效的检测手段。

来源：2024年第4期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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