畜牧兽医学报

作者：申琦, 王凯, 赵真坚, 陈栋, 余杨, 崔晟頔, 王俊戈, 陈子旸, 吴平先, 唐国庆

单位：1. 四川农业大学动物科技学院 农业农村部畜禽生物组学重点实验室, 成都 611130;2. 四川农业大学 畜禽遗传资源发掘与创新利用四川省重点实验室, 成都 611130;3. 四川农业大学动物科技学院 猪禽种业全国重点实验室, 成都 611130;4. 新希望六和股份有限公司, 北京 100102;5. 国家生猪技术创新中心, 重庆 402460

关键词：NOS2,DNA甲基化,NO,肌纤维,肌红蛋白

基金：国家生猪技术创新中心先导科技项目（NCTIP-XD/B01）；四川省科技厅项目（2020YFN0024；2021ZDZX0008；2021YFYZ0030）；四川省猪创新团队项目（sccxtd-2022-08）

旨在探究对一氧化氮合成酶（NOS）2进行DNA甲基化编辑后对肌红蛋白的调控作用机制，并研究其对神经元一氧化氮合酶（nNOS）和内皮细胞一氧化氮合酶（eNOS）的表达水平是否有影响。本试验采用DNA甲基化编辑技术在猪肾细胞系PK-15细胞对基因NOS2进行甲基化编辑，在猪肾细胞中检测NOS2基因启动子DNA甲基化水平、NOS2表达水平、细胞内一氧化氮浓度以及肌纤维和肌红蛋白相关基因的表达。结果发现，NOS2基因启动子前500 bp区域平均DNA甲基化水平降低，但差异不显著，而gRNA2结合位点附近的CpG位点甲基化水平增高。此外，对NOS2进行甲基化编辑后，NOS2基因表达量和其iNOS蛋白质表达量显著降低。随着NOS2表达降低，nNOS和eNOS表达显著增加。MYHC-Ⅱb和MYHC-Ⅱx的表达水平显著下降，Myoglobin蛋白表达也显著下降。综上，NOS2基因的异常表达能够影响细胞中的NO生成，同时也会影响NOS1和NOS3的表达，以及和肌肉发育相关基因的表达。

来源：2024年第3期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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