畜牧兽医学报

作者：肖敏, 赵威, 孙武, 娜日苏, 赵乐, 刘陶禄, 张继攀, 赵永聚

单位：1. 西南大学动物科学技术学院, 草食动物科学重庆市重点实验室, 重庆市牧草与草食家畜重点实验室, 重庆 400715;2. 青海大学畜牧兽医科学院, 西宁 810016;3. 内蒙古农业大学动物科学学院, 呼和浩特 010018

关键词：山羊,肤色,miR-129-5p,黑色素生成,TYR

基金：重庆市博士后科学基金项目（CSTB2023NSCQ-BHX0147）；重庆市技术创新与应用发展专项重点项目（CSTB2022TIAD-CUX0013）；重庆市现代农业产业技术体系（草食牲畜：CQMAITS202313）

旨在筛选对黑色素生成起调节作用的小RNA，并探究其对山羊肤色及毛色的调控机制。本研究采集了健康酉州乌羊（Youzhou dark goat，YZDG）、川东白山羊（Chuandong white goat，CDWG）100日龄胎羊皮肤样本（n=3），和健康2~3周岁大足黑山羊（Dazu black goat，DBG）、内蒙古绒山羊（Inner Mongolia cashmere goat，IMCG）个体皮肤样本（n=3），利用组织切片染色技术观察皮肤中黑色素沉积情况；通过小RNA测序技术筛选差异miRNAs；培养B16-F10皮肤黑色素瘤细胞，利用细胞转染、qPCR、Western Blot、黑色素含量检测等技术验证miR-129-5p对黑色素生成的影响。结果显示，黑色素颗粒明显在YZDG胎羊皮肤和DBG毛囊的毛球、毛干、外根鞘等部位沉积，而在CDWG胎羊皮肤和IMCG表皮、毛囊中没有被观察到。经测序分析，在肤色差异的YZDG和CDWG中筛选到62个差异表达miRNAs，其中31个在乌皮山羊中上调，31个下调。在毛色差异的DBG和IMCG中，筛选到38个差异表达miRNAs，其中10个在黑色被毛山羊中表达上调，28个表达下调。两组测序结果均显示miR-129-5p在乌皮和黑色被毛山羊皮肤中高表达（P<0.05）。在细胞中过表达miR-129-5p后，相比于对照组，mimics组细胞黑色素沉积量提高了18.9%（P<0.05），TYR、TYRP1基因表达量分别上调57.3%和16.5%（P<0.05），蛋白表达量分别显著上调49.2%和40.2%（P<0.05）；但MITF基因及其蛋白表达量无显著变化（P>0.05）。在抑制miR-129-5p后，inhibitor组TYR基因mRNA表达下调38.9%、蛋白表达水平下调21.1%（P<0.05）；TYRP1、MITF蛋白表达水平分别下调25.3%及28.4%（P<0.05）。本研究发现，miR-129-5p在不同肤色及毛色的山羊皮肤中差异表达，且可通过调控TYR、TYRP1等关键基因的表达影响黑色素的生成，是山羊肤色和毛色形成过程的重要调节因子。

来源：2024年第3期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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