畜牧兽医学报

作者：虎巧燕, 翟相钦, 李一丹, 韩家乐, 雷初朝, 党瑞华

单位：西北农林科技大学动物科技学院, 杨凌 712100

关键词：牛睾丸支持细胞,miR-101,增殖,凋亡

基金：国家肉牛牦牛产业技术体系项目（CARS-37）；陕西省秦创原科学家+工程师项目（2022KXJ-112）；中央引导地方项目（K3030922098）

旨在探究bta-miR-101对牛睾丸支持细胞增殖、凋亡及分泌的影响。本研究采集3日龄（n=3）与13月龄（n=3）健康公牛的睾丸组织，构建安格斯牛组织表达谱，验证bta-miR-101在两个时期的差异表达。利用在线工具（TargetScan、miRTarBase、miRDB及miRWalk）预测miR-101的靶基因，并利用KOBAS对其进行GO和KEGG通路富集分析。将miR-101的模拟物与抑制物分别转染至牛睾丸支持细胞中，利用RT-qPCR、Western Blotting以及CCK-8等技术检测细胞增殖、凋亡及分泌相关基因表达量以及细胞增殖系数。通过4种在线软件预测到26个bta-miR-101的共同靶基因，GO和KEGG富集分析发现这些基因主要富集在核质、蛋白质结合、JAK-STAT 的受体信号通路上，这些信号通路与细胞分化、细胞周期、细胞凋亡等生物过程有着不同程度的关联。RT-qPCR结果显示，bta-miR-101在牛初生期睾丸组织中的表达量显著高于性成熟时期（P<0.05），与实验室前期测序结果一致。转染miR-101的模拟物与抑制物后，发现相较于对照组，miR-101 mimics可以促进增殖相关基因在mRNA和蛋白水平的表达量，并显著升高支持细胞的增殖系数，同时抑制凋亡基因在mRNA和蛋白水平的表达量（P<0.05）；miR-101 inhibitor可以抑制增殖相关基因在mRNA和蛋白水平的表达量，同时促进凋亡基因在mRNA和蛋白水平的表达量（P<0.05）。在细胞分泌方面，miR-101对分泌标志基因GDNF、BMP4的转录有影响，但对雄激素结合蛋白的分泌影响不显著。综上所述，miR-101促进牛睾丸未成熟支持细胞的增殖并抑制其凋亡，对雄激素结合蛋白的分泌无显著影响。

来源：2024年第3期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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