畜牧兽医学报

作者：黄媛媛, 王佳, 陈嘉瑜, 甘源, 袁厅, 冯志新, 邵国青, 王先炜, 熊祺琰

单位：1. 南京农业大学动物医学院, 南京 210095;2. 江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室, 南京 210014;3. 兽用生物制品(泰州)国泰技术创新中心, 泰州 225300

关键词：腹膜间皮细胞,原代培养,猪,猪鼻支原体

基金：国家重点研发计划（2022YFD1800903）；江苏省农业科技自主创新资金（CX（22）3195）；国家自然科学基金项目（32102675）

本研究旨在建立猪原代腹膜间皮细胞（peritoneal mesothelial cell，PMC）的分离和体外培养方法，并将其初步应用于猪鼻支原体（Mycoplasma hyorhinis，Mhr）体外感染细胞模型。采用0.1% Ⅰ型胶原酶消化猪大网膜组织分离猪PMC细胞，通过形态学、免疫学方法鉴定细胞。使用Mhr感染PMC细胞，观察细胞形态变化，并利用乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase， LDH）法检测细胞活性损伤情况。结果显示，倒置相差显微镜观察显示，分离培养的细胞早期呈拉网状，5~8 d后生长可达融合状态，细胞大小均一，呈多边形铺路石状；间接免疫荧光试验结果显示，细胞波形蛋白、角蛋白-18抗原呈阳性，第VIII因子相关抗原、白细胞CD45抗原呈阴性；扫描电镜下可见细胞表面微绒毛。结果证实分离培养的细胞为猪PMC细胞，纯度达95%以上。Mhr感染后，光镜下可观察到细胞发生明显皱缩，感染组细胞的LDH释放量较对照组细胞显著升高。本研究成功建立了猪原代PMC细胞的分离培养方法，并初步用于Mhr体外感染，为研究Mhr等引起浆膜炎的病原与宿主的互作机制提供了体外细胞模型。

来源：2024年第3期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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