畜牧兽医学报

作者：王鑫, 聂桐, 李阿群, 马隽

单位：1. 东北农业大学动物医学学院, 哈尔滨 150030;2. 黑龙江省实验动物与比较医学重点实验室, 哈尔滨 150030

关键词：橙皮苷,高脂,转录组测序,KEGG富集分析,氧化磷酸化途径,氧化应激

基金：黑龙江省博士后资助项目（LBH-Z21101）；东北农业大学"学术骨干"项目（20YJXG03）

旨在研究橙皮苷（Hesperidin，HDN）对高脂饲喂诱导的小鼠肝氧化应激损伤的保护作用及作用机制。将18只雄性C57BL/6（体重20~23 g）小鼠，随机分为对照（control）组、高脂饮食（HFD）组、高脂饮食+橙皮苷（HFD+HDN）组（300 mg·kg-1），每组6只。control组小鼠饲喂常规饲料（脂肪含量10%、碳水化合物含量70%、蛋白质含量20%）；HFD组小鼠饲喂高脂饲料（脂肪含量60%、碳水化合物含量20%、蛋白质含量20%）；HFD+HDN组在饲喂高脂饲料的同时每天灌胃给药HDN 300 mg·kg-1。16周后腹腔注射3%戊巴比妥钠（60 mg·kg-1）麻醉小鼠后进行眼球采血，采血完毕后对小鼠进行脱颈处死并解剖取肝组织；使用试剂盒检测血液中肝功能指标丙氨酸转氨酶（ALT）和天冬氨酸转氨酶（AST）的活性；使用试剂盒检测肝组织中氧化应激指标丙二醛（MDA）、总超氧化物歧化酶（T-SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）以及总抗氧化能力（T-AOC）的水平；采集肝组织进行转录组学测序，筛选出HFD组和HFD+HDN组的差异表达基因集进行KEGG通路富集分析，以P<0.05作为显著性富集的阈值，据此筛选出HDN干预后影响最显著的一条信号通路；从筛选出的信号通路上挑选显著变化的基因并采取qRT-PCR和蛋白免疫印迹的方法验证转录组学结果；检测mtDNA相对含量和线粒体外膜蛋白（TOMM20）相对表达量；检测肝组织ATP含量。结果显示：与HFD组相比，HDN干预改善了高脂饲喂引起的肝损伤，显著降低了小鼠血液中ALT以及AST活性（P<0.01）；显著降低小鼠肝MDA含量（P<0.01）；显著升高T-AOC、T-SOD以及GSH-Px水平（P<0.05），KEGG富集分析，筛选出氧化磷酸化（OXPHOS）途径是最显著上调的信号通路（P<0.000 1）；与HFD组相比，HDN干预后肝组织Cox8b、Cox6a2、Gm10231、mt-Atp8、mt-Nd4l、Gm11237、Ndufb8、Ndufb10的mRNA相对表达量显著上调（P<0.05），Atp6v0d2、Cox6c2的mRNA的相对表达量显著下调（P<0.05）。Cox6a2、Ndufb8、Ndufb10的蛋白表达量显著升高（P<0.05），Atp6v0d2d蛋白表达量表达量显著降低（P<0.001），与转录组学结果一致；与HFD组相比，HDN干预后TOMM20相对表达量、mtDNA相对含量、ATP含量显著升高（P<0.05）。结果提示，HDN通过调节OXPHOS途径降低高脂饲喂诱导的小鼠肝氧化应激。

来源：2024年第3期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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