畜牧兽医学报

作者：翁雅娟, 李蓓, 芒来, 薛嘉宁, 特日格乐, 宋代玲, 王国庆, 蔺雅楠

单位：内蒙古农业大学动物科学学院, 内蒙古自治区马属动物科学研究与技术创新重点实验室, 农业农村部马属动物遗传育种与繁殖科学观测实验站, 内蒙古农业大学马属动物研究中心, 呼和浩特 010018

关键词：蒙古马,hnRNPF,精子生成,可变剪接

基金：内蒙古农业大学青年教师科研能力提升专项(BR230152);内蒙古农业大学动物科学学院高水平成果培育专项项目(QT202216)

旨在探究可变剪接因子核不均一核糖核蛋白F(heterogeneous nuclear ribonucleoprotein F,hnRNPF)对蒙古马精子生成的影响。本研究提取并培养3岁性成熟蒙古马睾丸支持细胞;构建hnRNPF过表达慢病毒载体,将载体转染至蒙古马睾丸支持细胞中;每组3个重复,分别在转染0、24、48、72 h时利用CCK-8检测转染后细胞增殖情况并确定最佳转染时间;提取转染后与未转染的蒙古马睾丸支持细胞RNA,设计已知与精子生成相关基因的引物进行qRT-PCR试验,检测精子生成相关基因在两种细胞中的表达情况。琼脂糖凝胶电泳结果显示,hnRNPF慢病毒过表达载体构建成功;CCK-8检测发现,细胞经过表达慢病毒载体转染72 h后活性最高,并且转染后细胞活性要高于未转染细胞活性,说明hnRNPF过表达会促进蒙古马睾丸支持细胞的增殖;qRT-PCR结果显示,精子生成相关基因(PKMYT1、CDC25C、YWHAZ、BUB1、BTRC、CCNE1、CALM1、PLK1、REC8、MAPK3、ADCY7)在两种细胞中的表达量差异显著,均在转染hnRNPF过表达载体细胞中含量较高。本试验结果表明,剪接因子hnRNPF可能对于蒙古马精子生成具有直接或间接的促进作用,为提高蒙古马精子数量和精液品质提供了新的思路。

来源：2024年第2期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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