畜牧兽医学报

作者：毕振威, 王文杰, 刘雅坤, 彭大新

单位：1. 江苏省农业科学院兽医研究所 农业农村部兽用生物制品工程技术重点实验室, 南京 210014;2. 扬州大学 江苏省人兽共患病学重点实验室, 扬州 225009;3. 兽用生物制品(泰州)国泰技术创新中心, 泰州 225300

关键词：A型流感病毒(IAV),犬酸性核磷蛋白32A(caANP32A),RNA聚合酶活性,哺乳动物适应性

基金：江苏省人兽共患病学重点实验室资助项目(R2101)

物种特异的酸性核磷蛋白32A(acidic nuclear phosphoprotein 32A, ANP32A)调节不同宿主A型流感病毒RNA聚合酶活性。为分析犬ANP32A(canine ANP32A, caANP32A)的物种特异性及其在流感病毒跨物种感染中的作用,利用RT-PCR方法从MDCK细胞以及犬肺、脾、肠不同组织中扩增和克隆caANP32A;激光共聚焦试验分析caANP32A与A型流感病毒RNA聚合酶的相互作用;双荧光素酶报告基因试验检测过表达caANP32A对A型流感病毒RNA聚合酶活性的影响。结果显示,从MDCK细胞中扩增到新的caANP32A,比已报道的caANP32A多出4个氨基酸插入,从犬肺、脾和肠组织中均扩增到该新的caANP32A;对caANP32A的基因进行测序分析,发现该新的caANP32A不是由mRNA选择性剪接形成的;激光共聚焦试验发现,新caANP32A与H3N2 CIV的RNA聚合酶在细胞核中共定位;聚合酶活性试验显示,在哺乳动物细胞过表达新caANP32A不能促进H9N2禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)和H3N2犬流感病毒(canine influenza virus, CIV)的RNA聚合酶活性,而鸡ANP32A(chANP32A)能够促进。本研究克隆的新caANP32A较以往报道,在176至179位存在四个氨基酸LSLV的插入,但新caANP32A对AIV的RNA聚合酶活性仍然有物种限制性且该新的caANP32A也未增强CIV的RNA聚合酶活性。本研究为进一步解析犬在流感病毒跨物种感染中的作用提供依据。

来源：2024年第2期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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