畜牧兽医学报

作者：苗舒, 安济山, 王祚, 肖定福, 兰欣怡, 刘磊, 沈维军, 万发春

单位：1. 湖南农业大学动物科学技术学院, 长沙 410128;2. 湖南农业大学动物医学院, 长沙 410128

关键词：亮氨酸,牛,骨骼肌,成肌细胞增殖,RNA-Seq,PI3K-AKT

基金：国家自然科学基金面上项目（32172758）；湖南省科技厅科技创新团队项目（2021RC4060）；国家重点研发计划（2022YFD1301101-1）；国家肉牛牦牛产业技术体系（CARS-37）

旨在探究外源补充亮氨酸（Leu）对牛成肌细胞增殖的影响及其作用机理。本试验以牛成肌细胞为研究对象，利用CCK-8法和EdU染色法检测不同浓度的Leu对牛成肌细胞增殖的影响，确定Leu的最佳添加浓度；以最佳浓度Leu为处理组、0 mmol·L-1 Leu为对照组进行转录组测序（RNA-Seq），筛选Leu调控牛成肌细胞增殖的关键通路。利用qRT-PCR验证关键通路中的关键调控基因，并通过添加抑制剂进行进一步验证。结果显示，添加Leu可提高牛成肌细胞活力，其中0.5 mmol·L-1 Leu显著提高成肌细胞活力和EdU阳性率（P<0.05）。Leu组和对照组差异表达基因有1 290个，其中688个上调，602个下调。KEGG富集分析，所注释的309个上调基因涉及47条显著富集通路，其中与骨骼肌生长发育相关通路中最为显著的是PI3K-AKT信号通路，包含34个上调基因。随机挑选PIK3R1、FOXO3、IRS1、RPTOR、MTOR和MET等6个差异表达基因进行qRT-PCR验证，结果与RNA-Seq一致。添加PI3K-AKT信号通路中PI3K的抑制剂LY294002后，阻断了Leu对牛成肌细胞增殖的促进作用。综上所述，Leu可通过PI3K-AKT信号通路促进牛成肌细胞的增殖。

来源：2024年第1期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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