畜牧兽医学报

作者：姚颖, 周应聪, 杜培岩, 李一娟, 钱文洁, 李柳杨, 余志鹏, 崔燕, 余四九, 樊江峰

单位：1. 甘肃农业大学动物医学院, 兰州 730070;2. 甘肃省牛羊胚胎工程技术研究中心, 兰州 730070

关键词：TMT,蛋白质组学,牦牛,血清,差异表达蛋白,妊娠维持

基金：国家自然科学基金（31660732）；甘肃省科技重点研发计划（农业类）项目（20YF8NA131）；陇原青年创新创业人才项目（2021LQGR47）

为了探究妊娠期内牦牛血清的蛋白质组特征，筛选并分析差异表达蛋白质（DEPs）在牦牛妊娠维持中的作用。本研究选择9头4岁半至6岁龄健康状况良好且当年未产犊的自然发情母牦牛进行人工授精（AI）。在AI后第30、60及90天采集其血清样品，并对授配母牦牛进行妊娠诊断。依据诊断结果将采集的样品进行回顾性分组，即妊娠第1、2、3月组及未妊娠组（未妊娠组样品来自AI后90天经妊娠诊断确诊为未孕的牦牛个体），每组样品3个生物学重复。利用串联质谱标签（TMT）技术对牦牛血清样品的蛋白表达情况进行定量分析，筛选差异表达蛋白，并对其进行GO功能富集和KEGG通路等生物信息学分析，进一步筛选与牦牛妊娠维持相关的潜在蛋白。结果显示，在4组牦牛血清蛋白样品中共获得497个蛋白，以差异倍数≥1.2或≤0.83，且P<0.05为条件筛选，共筛选到68个差异蛋白。GO功能富集和KEGG通路分析显示，这些DEPs在代谢、免疫系统、粘附、生物调节等生物学过程以及补体与凝血级联、金黄色葡萄球菌感染等与炎症和免疫途径相关的通路有明显富集。值得注意的是，妊娠期各组间差异蛋白富集通路中均包含有PI3K-Akt、Rap1、MAPK等与生殖相关的信号通路。DEPs中IGFBP2、FGG、B2M、PDIA4、AZGP1的表达具有随妊娠时间的延长而连续上调的趋势，且这些蛋白在妊娠第3月表达量显著高于未妊娠状态。研究结果表明，牦牛妊娠早期存在明显的血清蛋白组的变化。这些DEPs分别在促进细胞粘附与增殖、母胎血管生成、维持母体代谢与免疫平衡等过程中起到重要作用。尤其是IGFBP2、FGG、B2M、PDIA4、AZGP1可能通过参与调节胎盘生长发育、免疫应答和脂质代谢等过程，在牦牛妊娠维持中发挥着重要作用。研究结果为进一步探明牦牛维持妊娠过程的调控机制提供了基础资料。

来源：2024年第1期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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