畜牧兽医学报

作者：于秀菊, 张敏爱, 胡燕姣, 朱芷葳, 王海东, 杨丽华, 范阔海

单位：1. 山西农业大学动物医学学院, 太谷 030801;2. 太原海关技术中心, 太原 030000;3. 山西农业大学生命科学学院, 太谷 030801;4. 山西农业大学实验动物管理中心, 太谷 030801

关键词：枯草芽孢杆菌,细菌素,分离,表达,稳定性

基金：山西农业大学博士科研启动项目（2021BQ74）；山西省青年科学基金项目（No.201801D221301）

旨在分离枯草芽孢杆菌及其所产细菌素，并分析重组表达后的细菌素的抑菌活性和稳定性。通过牛津杯扩散法筛选羊驼粪便中高产细菌素的芽孢杆菌；借助16S rRNA鉴定分离菌；采用硫酸铵沉淀、氯仿抽提、SDS-PAGE、质谱分析等技术获得细菌素的氨基酸序列；利用大肠杆菌表达系统对细菌素进行体外表达，并利用牛津杯扩散法测定其抑菌活性和稳定性。结果显示，分离菌是一种枯草芽孢杆菌，命名为枯草芽孢杆菌SXAU18，其可产生抑制金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、藤黄微球菌和单增李斯特菌生长的细菌素；枯草芽孢杆菌SXAU18所产细菌素可能是分子量为10~20 ku的DarA蛋白和两种未知蛋白，属于类细菌素的范畴，将未知蛋白分别命名为BLIS SXAU181和182；经原核表达的BLIS SXAU181和182主要以可溶性上清蛋白形式表达，纯化后为单一条带；重组BLIS SXAU181蛋白没有抑菌活性，重组BLIS SXAU182蛋白具有良好的抑菌活性，且具有耐高温、耐酸碱、耐人工胃液和肠液的的特性。综上，本研究从枯草芽孢杆菌SXAU18分离到具有抑制革兰阳性菌生长活性的细菌素，且重组表达后的BLIS SXAU182具有良好的抑菌活性和和稳定性。

来源：2024年第1期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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