畜牧兽医学报

作者：李惠惠, 董可儿, 刘馨博, 张春晓, 马超, 陈利苹, 钟旗, 姚刚, 马雪连

单位：1. 新疆农业大学动物医学学院, 乌鲁木齐 830052;2. 动物保健与畜产品质量安全研究实验室, 乌鲁木齐 830052;3. 乌鲁木齐市动物园, 乌鲁木齐 830001;4. 深圳市真瑞生物有限公司, 深圳 518000;5. 新疆畜牧科学院兽医研究所, 乌鲁木齐 830000

关键词：牛诺瓦病毒,牛轮状病毒,重组酶介导扩增,侧向流试纸条

基金：国家自然科学基金（32002251）：肉生高效健康饲养技术集成研究与示范（2021A02003-1）

为建立能同时检测牛诺瓦病毒（bovine norovirus， BNoV）和牛轮状病毒（bovine rotavirus， BRV）的重组酶辅助扩增-侧流层析试纸条（recombinase aided amplification-lateral flow dipstick， RAA-LFD）快速检测方法。本试验按照RAA引物探针设计原则，分别针对BNoV RdRp基因和BRV VP7基因的保守区设计引物和探针，制备标准重组质粒，建立并优化RAA-LFD反应体系，同时对该检测方法进行特异性、敏感性及重复性评估，用建立的RAA-LFD法与PCR法、qPCR法分别对采集的168份腹泻犊牛的临床样本进行平行检测。结果显示，该方法可在20 min，39℃的条件下扩增目标片段，对BNoV和BRV敏感度均为103 copies·μL-1，与PCR的检测结果基本一致，且与牛冠状病毒（bovine coronavirus， BCoV）、牛病毒性腹泻病毒（bovine viral diarrhea virus， BVDV）和牛传染性鼻气管炎病毒（infectious bovine rhinotracheitis virus， IBRV）无交叉反应，虽低于qPCR检测结果，但可通过肉眼直接观察试纸条的检测结果。综上所述，RAA-LFD法灵敏度较高、且简便、快速、同时不依赖于仪器、专业操作人员，适用于现场检测。

来源：2024年第1期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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