畜牧兽医学报

作者：周立坤, 董鑫媛, 李家辉, 崔志莹, 赵士杰, 徐婕, 陈静, 张宜娜, 夏平安

单位：1. 河南农业大学生命科学学院, 郑州 450002;2. 河南农业大学动物医学院, 郑州 450002

关键词：MID2,猪繁殖与呼吸综合征病毒,I-IFN,RIG-I

基金：河南省重点研发与推广专项(科技攻关)项目(222102110297);国家青年科学基金资助项目(31802166)

本试验旨在研究MID2(midline 2)对猪繁殖与呼吸综合征病毒 (porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)复制的调控作用。首先用PRRSV BJ-4毒株感染MARC-145细胞,通过RT-qPCR和Western blot技术分别检测MID2的mRNA转录水平和蛋白表达水平,发现PRRSV感染能够上调MID2的表达。为了进一步探究MID2对PRRSV复制的影响,本研究过表达或沉默MID2表达,再接种PRRSV,通过RT-qPCR和Western blot技术,检测PRRSV ORF7的转录水平及N蛋白的表达水平,结果显示MID2能够抑制PRRSV复制。随后将pCMV-Flag-MID2和pGL3-IFN-β-Luc真核表达质粒共转染到HEK293T细胞中,通过双荧光素酶报告基因试验检测IFN-β的启动子活性,结果表明MID2能够正调控I-IFN信号通路。最后将MID2与RIG-I的真核表达质粒共转染到HEK293T细胞中,通过Co-IP试验发现MID2和RIG-I存在相互作用,且MID2能够以剂量依赖的方式促进RIG-I的表达,增强RIG-I介导的I-IFN信号通路。以上结果说明,MID2可能通过与RIG-I互作,促进RIG-I的表达,并激活I-IFN信号通路,从而抑制PRRSV复制。本研究首次发现MID2通过正调控I-IFN信号通路抑制PRRSV复制。

来源：2023年第11期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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