畜牧兽医学报

作者：毕欢, 覃海, 袁巍, 张雨丹, 张依裕, 陈伟

单位：1. 高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室, 贵阳 550025;2. 贵州省动物遗传育种与繁殖重点实验室, 贵阳 550025;3. 贵州大学动物科学学院, 贵阳 550025

关键词：TYRP1,黑素细胞,siRNA,HE染色,多巴染色,黑色素

基金：贵州省科技计划项目（黔科合支撑【2022】一般087）；贵州大学引进人才科研项目（贵大人基合字（2019）34号）；贵州省优秀青年科技人才培养计划黔科合平台人才（[2021]5630号）；贵州省生猪种业发展项目（黔农计财[2022]10号）；贵州省生猪产业发展项目（2021；2022）

旨在探究酪氨酸相关蛋白酶1（tyrosinase related protein 1，TYRP1）对香猪原代表皮黑素细胞黑色素生成的影响。本研究选用具有"两头乌"毛色特征的3月龄健康香猪3头，每头猪采取头部黑色皮肤组织和背部白色皮肤组织。通过HE染色观察不同颜色香猪皮肤的毛囊结构及黑素细胞的分布特征；体外培养香猪原代表皮黑素细胞并通过多巴（L-Dopa）染色、实时荧光定量PCR和Western Blot方法进行鉴定；根据TYRP1基因序列构建5条siRNA，采用实时荧光定量PCR筛选出干扰效率最高的siRNA进行转染。成功干扰黑素细胞内TYRP1的表达后，分别通过实时荧光定量PCR、Western Blot、黑色素含量检测方法对黑素细胞内TYR、TYRP1及TYRP2的mRNA与蛋白相对表达量、细胞内总黑色素含量进行检测。结果显示，在香猪黑色和白色皮肤中都观察到完整的毛囊结构，黑素细胞主要分布在香猪黑色被毛皮肤中的毛囊外根鞘部位以及表皮。在MelM培养基作用下，黑素细胞生长旺盛，细胞形态、生长曲线、多巴染色、实时荧光定量PCR及Western Blot结果均表明培养的黑素细胞维持正常的生物学特性。敲降TYRP1后下调香猪表皮黑素细胞中黑色素生成相关基因TYR、TYRP1和TYRP2的mRNA和蛋白的表达，同时对黑色素的形成具有抑制作用。TYRP1基因能够影响香猪表皮黑素细胞黑色素的生成，研究结果可为探索TYRP1基因对香猪黑色素沉积的分子机制提供试验参考和基础数据。

来源：2023年第10期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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