畜牧兽医学报

作者：谢青云, 易玮婕, 李嘉豪, 白昀, 谢星, 袁厅, 张越, 冯余凡, 赵东明, 步志高, 刘斐, 冯志新

单位：1. 江苏省农业科学院兽医研究所, 农业农村部兽用生物制品工程重点实验室, 南京 210014;2. 南京农业大学动物医学院单分子纳米生物学实验室, 南京 210095;3. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室, 哈尔滨 150069;4. 兽用生物制品(泰州)国泰技术创新中心, 泰州 225300

关键词：非洲猪瘟,sIgA抗体,量子点免疫试纸条,现场即时检验

基金：国家重点研发计划政府间国际科技创新合作重点专项（2019YFE0107300）；江苏省农业科技自主创新项目（CX（20）2035）

非洲猪瘟（African swine fever，ASF）是由非洲猪瘟病毒感染引起的一种烈性猪传染病，其极高的传染性和发病率给养猪产业造成了巨大的经济损失。目前尚无安全有效的ASF疫苗，因此早期监测是防控ASF最重要的解决方案之一。建立敏感、快速的ASF现场即时检验方法，对维护生猪产业繁荣具有重要意义。首先基于氨基和羧基的偶联反应制备量子点微球（quantum dot microsphere，QDM）偶联ASFV重组抗原蛋白p30的检测探针和QDM-兔抗鸡IgY质控探针；接着在检测线和质控线分别固定鼠抗猪IgA-Sc片段抗体和鸡IgY蛋白制备侧向流免疫试纸条；待检动物口腔液中的ASF sIgA抗体经QDM-p30捕获可被固定至T线。将ASFV阳性口腔液以2倍梯度稀释，检测该方法的灵敏度。通过检测其他几种常见猪病病毒验证该方法的特异性。通过检测ASFV阴性和阳性动物的口腔液临床样本评价该方法的临床诊断效能。该方法特异性好，与PRV、CSFV、PRRV不存在交叉反应；灵敏度高，最低检出稀释度可达1：64；耗时短，可在20 min内完成检测；操作便捷，无需侵入式采样；检出时间早，人工感染最早可于感染后第6天检出。本研究开发了一种口腔液中ASF sIgA抗体的现场即时检验（point-of-care testing，POCT）量子点免疫试纸条，为ASFV的监测和防控提供了新的技术支持和补充。

来源：2023年第10期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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