畜牧兽医学报

作者：邹宏, 夏应菊, 李玲, 徐璐, 赵俊杰, 王团结, 张乾义, 宋振辉

单位：1. 西南大学动物医学院, 重庆 402460;2. 中国兽医药品监察所 国家/WOAH猪瘟参考实验室, 北京 100081

关键词：猪瘟病毒,牛流行性腹泻病毒,双重荧光定量PCR

基金：“十四五”国家重点研发计划项目《兽用生物制品标准物质研制》子课题"牛羊等草食动物疫苗检验用菌毒种库建立"（2022YFD1800601-4）

本研究旨在建立一种快速、高效、灵敏的猪瘟病毒（CSFV）和牛病毒性腹泻病毒（BVDV）双重鉴别荧光定量PCR检测方法，针对CSFV E2基因和BVDV 5'UTR基因序列的高度保守区域设计特异性引物和探针，经过反应条件及体系的优化，建立双重RT-qPCR方法。结果表明，该方法最低检测值均为5 copies·μL-1，比普通PCR灵敏约200倍，敏感性高；可准确区分CSFV和BVDV，且与口蹄疫病毒、猪伪狂犬病病毒等猪常见病原均无交叉反应，特异性强；组内和组间重复变异系数均小于2%，重复性良好。对109份临床样品及7份商品化牛血清分别采用构建的双重RT-qPCR检测方法及CSFV RT-qPCR检测方法（GB/T 27540—2011）和BVDV RT-qPCR检测方法（GB/T 18637—2018）进行检测和对比，符合率为100%，同时，检测结果还证实目前商品化牛血清中仍存在BVDV污染，为CSFV、BVDV的鉴别诊断及流行病学的调查提供了技术支持。

来源：2023年第10期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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