畜牧兽医学报

作者：杨悦, 王锐, 甘源, 郝飞, 谢星, 张磊, 邵国青, 孟庆国, 陈蓉, 冯志新

单位：1. 南京师范大学海洋科学与工程学院, 南京 210023;2. 江苏省农业科学院兽医研究所, 农业农村部兽用生物制品工程重点实验室, 南京 210014;3. 南京农业大学生命科学院, 南京 210095;4. 兽用生物制品(泰州)国泰技术创新中心, 泰州 225300

关键词：猪初乳,SIgA,纯化,鉴定

基金：国家重点研发计划政府间国际科技创新合作重点专项(2019YFE0107300);江苏省农业科技自主创新资金项目(CX(22)3029);国家自然基金面上项目(32273011)

分泌型免疫球蛋白A(SIgA)是黏膜免疫的主要效应分子,在临床上常常作为疾病早期诊断的靶标,此外,基于SIgA的治疗性单抗和靶向SIgA产生的黏膜疫苗也越来越受到关注。分离并纯化出完整且具有活性的SIgA是产品研发的前提。为了提高猪初乳中SIgA的纯化效率,本研究采用串联亲和层析,强阴离子柱和精细分子筛层析进行纯化,从10 mL初乳中获得3 mg具有活性的SIgA。使用Western blot对纯化的SIgA进行鉴定,结果表明,纯化的SIgA与抗猪的重链蛋白单抗和抗SC单抗均具有良好的反应性。使用ELISA测试SIgA与抗猪的IgA重链单抗的反应性,结果发现使用本方法纯化的SIgA较原先方法(即硫酸铵沉淀,DEAE52弱阴离子层析,SephadexG-200凝胶层析和多次亲和层析的纯化方法)具有更高的反应性。最后使用质谱鉴定纯化的蛋白,结果表明为猪的SIgA。本研究为从猪初乳中纯化SIgA建立了一种高效的纯化方法,也为其它来源的SIgA的纯化提供参考。

来源：2023年第9期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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