畜牧兽医学报

作者：张万锋, 赵天枝, 李娇, 尤紫薇, 杨阳, 蔡春波, 高鹏飞, 曹果清, 郭晓红, 李步高

单位：山西农业大学动物科学学院, 太谷 030801

关键词：NR2F2基因,Smad4基因,细胞增殖,PK15细胞

基金：国家自然科学基金面上项目（32272846）；山西省重点研发计划项目（202102140601005）

旨在探究NR2F2基因对猪PK15细胞增殖和凋亡的影响。本研究在猪PK15细胞中过表达NR2F2基因，通过qRT-PCR、Western blot、CCK-8、EdU、流式细胞术、划痕试验等方法检测了过表达NR2F2基因对细胞增殖的影响；采用CO-IP技术验证NR2F2与Smad4蛋白结合能力；用qRT-PCR方法检测了NR2F2基因对Smad4基因表达以及下游基因Cyclin B、CDK1、CDK4、Cyclin D1表达的影响；挽救试验过表达NR2F2基因且干扰Smad4基因检测下游基因及增殖基因Ki67、PCNA的表达。结果发现，过表达NR2F2基因极显著上调了Ki67基因的表达（P<0.01），显著上调了PCNA的表达（P<0.05），促进了细胞周期的进程，抑制了细胞凋亡，促进了细胞的增殖。CO-IP结果证明了NR2F2与Smad4蛋白物理性结合，且发现过表达NR2F2基因后，Smad4基因表达显著上升（P<0.01），Smad4基因调控的下游基因Cyclin B、CDK1、CDK4、Cyclin D1表达显著升高（P<0.01）；干扰NR2F2基因后，Smad4基因表达显著下降（P<0.01），Smad4基因调控的下游基因表达显著降低（P<0.01）。挽救试验发现，过表达NR2F2基因后，干扰Smad4基因的表达，能显著降低Cyclin D1、Cyclin B、CDK1以及Ki67、PCNA的表达（P<0.01，P<0.05）。本研究结果表明，过表达NR2F2基因后促进了细胞的增殖，抑制凋亡，且NR2F2蛋白能与Smad4蛋白结合并影响Smad4基因的表达，进而影响下游基因的表达。

来源：2023年第8期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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