畜牧兽医学报

作者：张寒月, 赵丹, 梁煜, 赵弼时, 范蒙丹, 乔利英, 刘建华, 杨凯捷, 潘洋洋, 刘文忠

单位：山西农业大学动物科学学院, 太谷 030801

关键词：广灵大尾羊,miR-150,AOC3,脂肪细胞分化

基金：国家自然科学基金（31972560）；山西省现代农业产业技术体系建设专项资金资助

旨在通过探究miR-150与AOC3的靶标关系，揭示miR-150在广灵大尾羊前体脂肪细胞分化过程中的作用机制。本研究以3只5日龄发育正常且健康的广灵大尾羊公羊为试验材料，采用qPCR方法检测广灵大尾羊皮下、肾周和尾部脂肪组织中miR-150的表达量；采集广灵大尾羊的尾部脂肪组织并分离绵羊前体脂肪细胞；通过细胞免疫荧光技术鉴定细胞纯度；利用生物信息学软件预测和双荧光素酶报告试验验证miR-150与AOC3的靶标关系；转染miR-150 mimics和inhibitors并检测AOC3和成脂分化标志基因的表达情况；构建并转染绵羊AOC3基因的过表达和干扰载体至绵羊前体脂肪细胞，利用qPCR和Western blotting检测miR-150与AOC3在广灵大尾羊前体脂肪细胞分化中的表达规律；油红O染色检测成脂能力，上述试验方法均设立3个生物学重复。结果表明，miR-150在3个不同部位脂肪组织中尾部脂肪表达量最高，差异极显著（P<0.001）。与对照组相比，过表达miR-150后，AOC3基因和成脂标志基因的表达显著下调（P<0.05），且脂滴生成减少，抑制了绵羊前体脂肪细胞分化；抑制miR-150后，结果相反。miR-150与AOC3的3'-UTR存在结合位点，miR-150极显著降低了AOC3野生型的相对荧光活性（P<0.001）。过表达AOC3后，成脂分化标志基因的表达极显著上调（P<0.01），脂肪细胞产生了更多脂滴，AOC3促进了绵羊前体脂肪的分化；干扰AOC3后，结果相反。本研究表明，miR-150与AOC3的3'-UTR存在结合位点，在绵羊前体脂肪细胞分化的过程中，miR-150与AOC3的表达量呈负相关性，miR-150通过靶向AOC3抑制脂肪分化，研究结果为microRNAs （miRNAs）在分子水平上的研究提供了一定的理论依据。

来源：2023年第8期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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