畜牧兽医学报

作者：郭逸芯, 王之盛, 胡瑞, 王俊梅, 王森, 施丽媛, 张晓红, 邹华围, 左家学, 彭全辉, 薛白, 王立志

单位：1. 四川农业大学动物营养研究所, 肉用牛低碳养殖创新团队, 四川省牛低碳养殖与安全生产高校重点实验室, 成都 611130;2. 临沧市畜牧技术推广站, 临沧 677099

关键词：亮氨酸,黄牛,原代脂肪细胞,棕色化,线粒体生物合成

基金：四川省科技计划资助（2021YFYZ0001）；临沧市肉牛改良与产业化发展关键技术研究与示范（202104AC100001-A04）；财政部和农业农村部：国家现代农业（肉牛牦牛）产业技术体系（CARS-37）

旨在分离黄牛皮下前体脂肪细胞，探究亮氨酸对白色脂肪细胞棕色化以及脂质代谢的影响。本研究采取4头3岁的健康雄性黄牛（（351.7±42.5） kg）皮下脂肪组织分离前体脂肪细胞，混合后于细胞分化D 6-D 9添加不同浓度亮氨酸（0、0.5、1、2、4、8 mmol·L-1）（n=6）。RT-PCR检测棕色化标志基因，筛选亮氨酸诱导脂肪细胞棕色化的浓度，后续试验分为对照组（CON）和最佳浓度亮氨酸添加组（Leu）（n=6）。RT-PCR检测线粒体生物合成关键基因表达、mtDNA拷贝数以及脂质代谢相关基因的表达，Western Blot检测棕色化关键蛋白以及信号通路蛋白表达。Mito-tracker Green染色和油红O染色分别检测细胞内线粒体含量和脂滴形态的变化。结果表明，成功分离得到黄牛皮下前体脂肪细胞并诱导为成熟脂肪细胞。4 mmol·L-1亮氨酸显著提高脂肪细胞中棕色化标志因子UCP1、PRDM16和TMEM26的mRNA相对表达量，线粒体生物合成关键基因SIRT1、TFAM和NRF1/2的mRNA相对表达量，上调关键蛋白UCP1、CD137和SIRT1的表达量（P<0.01）。亮氨酸显著提高细胞中mtDNA拷贝数和线粒体含量（P<0.01），降低细胞内ATP含量（P<0.05），促使细胞脂滴由单房大脂滴向多房小脂滴转变，并降低细胞内甘油三酯的含量（P<0.01）。亮氨酸抑制脂肪合成基因ACC、FAS表达，促进脂肪分解基因ATGL、HSL和脂肪酸β氧化基因PPARα、CPT1、ACOX表达（P<0.01）。添加亮氨酸极显著上调p-AMPKα/AMPKα和PGC1α的蛋白表达量（P<0.01）。综上所述，亮氨酸能促进黄牛脂肪细胞棕色化和线粒体生物合成，促进脂肪分解抑制脂肪合成，减少细胞内脂质沉积，并上调p-AMPKα/AMPKα和PGC1α的蛋白表达量。

来源：2023年第8期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

查看畜牧兽医学报杂志2023年第8期