畜牧兽医学报

作者：郜康康, 扆妍妍, 赵一腾, 林鹏飞, 陈华涛, 靳亚平

单位：1. 西北农林科技大学动物医学院, 杨凌 712100;2. 西北农林科技大学 农业农村部动物生物技术重点实验室, 杨凌 712100

关键词：内质网应激,子宫内膜炎,脂多糖,NF-κB通路,NLRP3炎性小体

基金：宁夏回族自治区科技厅科技项目（201802060004）；科技部高端外国专家引进计划（G0222172033L）

探究内质网应激（endoplasmic reticulum stress，ERS）在脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）诱导的山羊子宫内膜上皮细胞（goat endometrial epithelial cells，gEECs）炎性反应中的作用，为阐明ERS在反刍动物子宫内膜炎中的作用机制提供前期基础。本研究使用ERS激活剂衣霉素（tunicamycin，TM）和抑制剂4-苯基丁酸（4-phenylbutyric acid，4-PBA）分别单独处理gEECs激活或抑制ERS，应用RT-qPCR和Western blot技术检测ERS对炎症相关基因表达的影响；接着，使用TM和4-PBA分别预处理gEECs，再利用大肠杆菌LPS处理诱导gEECs炎性反应，通过RT-qPCR和Western blot检测ERS对LPS诱导的gEECs炎性反应的影响及作用机制。结果显示，TM处理激活ERS显著抑制gEECs中炎性细胞因子IL-6和TNF-α mRNA的表达（P<0.05），显著抑制经典炎症通路相关基因TLR4、NF-κB P65和NLRP3 mRNA的表达（P<0.01）；同时，显著抑制NF-κB P65蛋白的磷酸化以及NLRP3蛋白的表达（P<0.05）。4-PBA处理则显著促进gEECs中炎症相关基因（IL-6、TNF-α、TLR4、NF-κB P65和NLRP3）的表达（P<0.05）。进一步研究发现，TM预处理gEECs显著抑制LPS诱导的炎性细胞因子IL-6 mRNA的表达（P<0.05）；显著抑制LPS诱导的TLR4、NF-κB P65和NLRP3 mRNA的表达以及NF-κB P65蛋白的磷酸化和NLRP3蛋白的表达（P<0.05）。4-PBA预处理gEECs则显著促进LPS诱导的gEECs炎性反应（P<0.05）。综上表明，ERS通过抑制NF-κB通路和NLRP3炎性小体通路的激活减轻LPS诱导的gEECs炎性反应，为进一步阐明山羊子宫内膜炎的发生发展提供了前期理论基础。

来源：2023年第8期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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