国内刊号:11-1985/S
国际刊号:0366-6964
发布日期:
作者:米慧, 彭灿, 贺志雄, 谭支良
单位:1. 中国科学院亚热带农业生态研究所 亚热带农业生态过程重点实验室 畜禽养殖污染控制与资源化技术国家工程实验室 湖南省畜禽健康养殖工程技术研究中心 农业部中南动物营养与饲料科学观测实验站 动物营养生理与代谢过程湖南省重点实验室 中国科学院亚热带农业生态研究所公共技术中心, 长沙 410125;2. 中国科学院大学, 北京 100049
关键词:分泌型免疫球蛋白A,分泌型免疫球蛋白A包裹细菌,微生物,流式细胞仪
基金:国家自然科学基金(32072760);湖南创新省份建设专项(2019RS3021)
本研究旨在建立1种基于流式细胞术(flow cytometry,FCM)的反刍动物消化道内容物中分泌型免疫球蛋白A (secretory immunoglobulin A,sIgA)包裹细菌的分选方法。随机选用4只健康、体况良好的成年肉用绵羊,采集回肠内容物制备菌液。对菌液上样浓度、细菌染料4’,6-二脒基-2-苯基吲哚(4’,6-diamidino-2-phenylindole,DAPI)最佳工作浓度和抗IgA抗体最佳使用浓度等进行优化。结果表明,内容物菌液最佳浓度为2.5~5 mg·mL-1,DAPI最佳工作浓度为5 μg·mL-1,抗IgA抗体最佳使用量为5 μg。重复性试验表明,该方法相对偏差小于5%,具有良好的稳定性和可重复性。本试验建立的sIgA包裹细菌分选方法选择性强、样品用量少、操作简单,可为反刍动物消化道sIgA包裹细菌的组成及功能等相关研究提供技术支撑。
来源:2023年第7期
《畜牧兽医学报》期刊编辑部