畜牧兽医学报

作者：刘杰, 许香萍, 邓铭, 邹娴, 江声伟, 刘德武, 柳广斌, 孙宝丽, 郭勇庆, 李耀坤

单位：1. 华南农业大学动物科学学院, 广州 510642;2. 广东省农业科学院动物科学研究所, 畜禽育种国家重点实验 室, 广东省畜禽育种与营养研究重点实验室, 广州 510640;3. 华南农业大学 畜禽育种国家地方联合工程研究中 心, 广州 510642;4. 华南农业大学, 广东省农业动物基因组学与分子育种重点实验室, 广州 510642

关键词：颗粒细胞,miR-144-5p,WNT5a,山羊,繁殖

基金：广东省现代农业产业技术体系项目(2021KJ127);广东省科技特派员项目(KTP20210344)

旨在探究miR-144-5p靶向WNT5a对山羊颗粒细胞增殖和凋亡的影响。本研究选用2岁健康雷州母山羊的卵巢颗粒细胞来过表达和抑制表达miR-144-5p及WNT5a,通过荧光定量PCR(real-time qPCR, RT-qPCR)、Western blot、双荧光素酶报告基因、CCK-8等技术来探究miR-144-5p与WNT5a对颗粒细胞增殖和凋亡的影响。结果表明,miR-144-5p在大卵泡颗粒细胞中的表达量极显著高于小卵泡颗粒细胞(P<0.01),WNT5a在大卵泡颗粒细胞中的表达量极显著低于小卵泡颗粒细胞(P<0.01);CCK-8检测发现,miR-144-5p抑制了GCs增殖,过表达miR-144-5p后,抑凋亡基因BCL-2的mRNA和蛋白表达极显著下调(P<0.01),促凋亡基因BAX的mRNA和蛋白表达极显著上调(P<0.01);Wnt/β-Catenin通路基因CTNNB1 mRNA和β-Catenin蛋白水平极显著降低(P<0.01);另外,miR-144-5p能靶向WNT5a抑制其表达。同时,CCK-8检测结果表明,WNT5a可促进GCs增殖,过表达WNT5a后,抑凋亡基因BCL-2的mRNA和蛋白水平极显著上调(P<0.01),促凋亡基因BAX的mRNA显著下调(P<0.05)、蛋白水平极显著下调(P<0.01),Wnt/β-Catenin通路CTNNB1 mRNA和β-Catenin蛋白水平极显著提高(P<0.01)。综上所述,在GCs中,miR-144-5p靶向负调控WNT5a的表达,调控Wnt/β-Catenin通路,进而上调BAX/BCL-2的比值来抑制颗粒细胞增殖并促进其凋亡,这可能对山羊的排卵数和产羔数产生一定的影响。

来源：2023年第6期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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