畜牧兽医学报

作者：贾鸿儒, 杨超群, 王萌, 吴章情, 昝林森, 杨武才

单位：西北农林科技大学动物科技学院, 国家肉牛改良中心, 杨凌 712100

关键词：乳脂肪,lncRNA,PPARγ,miR-27a-3p

基金：陕西省自然科学基金（2021JM-100）

旨在探究lncRNA-LRTN4RL1-AS/miR-27a-3p/PPARγ轴在奶牛乳脂合成中的作用及其调控机制。本研究以奶牛乳腺上皮细胞（bovine mammary epithelial cells，BMECs）为试验对象，对处理组与对照组进行3个生物学重复，通过实时荧光定量（real time quantitative PCR，RT-qPCR）、WB （Western blot）、油红O染色和甘油三酯检测、双荧光素酶报告等技术检测lncRNA-LRTN4RL1-AS对BMECs中甘油三酯积累及脂质合成相关基因表达量的影响，验证LRTN4RL1-AS-miR-27a-3p-PPARγ存在内源竞争RNA （competing endogenous RNAs，ceRNA）的靶向关系。结果表明，LRTN4RL1-AS主要在细胞质中表达，干扰LRTN4RL1-AS后显著抑制了BMECs的脂滴形成和甘油三酯积累（P<0.05），显著下调脂质合成相关基因CEBPα（P<0.01）、CEBPβ（P<0.01）和PPARγ（P<0.05）表达，且显著上调脂质分解基因HSL表达（P<0.05）；双荧光素酶报告试验发现，转染mimics-miR-27a-3p，LRTN4RL1-AS突变型组荧光素酶活性显著高于LRTN4RL1-AS野生型组（P<0.01），证实LRTN4RL1-AS与miR-27a-3p之间存在靶向结合关系；共转染试验发现，inhibitor-miR-27a-3p逆转了干扰LRTN4RL1-AS对乳脂合成的抑制作用（P<0.05），同时降低了si-LRTN4RL1-AS对PPARγ基因的表达抑制。结果显示，LRTN4RL1-AS通过竞争性结合miR-27a-3p调控PPARγ表达来调节BMECs乳脂合成。

来源：2023年第4期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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