畜牧兽医学报

作者：王涵, 蒙利洁, 刘文娇, 徐永健, 龚婷

单位：1. 贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室 贵州省动物遗传育种与繁殖重点实验室, 贵阳 550025;2. 贵州大学动物科学学院, 贵阳 550025

关键词：从江香猪,T1R3,RNA干扰,睾丸间质细胞,自噬

基金：国家自然科学基金（31702117）；贵州省科学技术项目（黔科合基础[2020]1Y135、黔科合基础[2018]1404）；贵州省科技计划项目（黔科合服企[2018]4007（002）号）

旨在探究TAS1R3基因通过mTOR对从江香猪自噬相关基因表达的影响。本试验选择30日龄健康雄性从江香猪3头，采集睾丸组织并培养出睾丸间质细胞。将构建成功的干扰载体和空载体转染至细胞中，利用qRT-PCR检测其对TAS1R3基因表达影响，运用qRT-PCR和Western blot检测TAS1R3基因干扰后对味觉受体第一家族一号受体（TAS1R1）、细胞外信号调节激酶1（ERK1）、细胞外信号调节激酶2（ERK2）、雷帕霉素靶蛋白（mTOR）、BECN1和微管相关蛋白1轻链3β（MAP1LC3B）表达的影响。结果表明，当TAS1R3基因被干扰后，相较于shRNA-NC对照组，TAS1R1、ERK1、ERK2、mTOR基因mRNA表达量均极显著降低（P<0.01），自噬因子BECN1和MAP1LC3B表达量极显著升高（P<0.01）。Western blot结果表明当TAS1R3基因被干扰后，与shRNA-NC对照组相比，蛋白T1R3、T1R1、p-mTOR、p-S6K1、p-ERK12均极显著降低（P<0.01），而自噬蛋白Beclin 1表达量极显著升高（P<0.01）。本试验通过将TAS1R3基因干扰载体转染至睾丸间质细胞，发现当TAS1R3基因被干扰后可通过影响mTOR基因的表达，调控其下游自噬因子的表达，提示TAS1R3基因与睾丸间质细胞的自噬密切相关，这为进一步研究TAS1R3基因通过调节自噬影响香猪生殖活动提供了借鉴。

来源：2023年第4期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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