畜牧兽医学报

作者：王宏宇, 朱寅初, 云涛, 张存, 鲍恩东

单位：1. 南京农业大学动物医学院, 南京 210095;2. 浙江省农业科学院畜牧兽医研究所, 杭州 310021

关键词：鹅星状病毒Ⅰ型,鹅星状病毒Ⅱ型,双重荧光定量RT-PCR,TaqMan探针

基金：浙江省自然科学基金资助项目（LGN22C180005）；浙江省重点研发计划项目（2019C02052）；浙江省农业重大技术协同推广项目（2021XTTGXM04-02）；科技部外传项目（产业技术创新类，G20200010082）；江苏省农业科技自主创新资金项目（CX（22）2016）

鹅星状病毒（goose astroviruses，GAstV）作为一种雏鹅新发病原，对养鹅业造成巨大经济损失，在尚无有效治疗手段情况下，加强疫病及时检测和防控十分重要。为建立快速、特异且灵敏的鉴别GAstV Ⅰ型和GAstV Ⅱ型的病毒检测方法，本研究根据GAstV Ⅰ和GAstV Ⅱ的保守区域RdRp基因序列，设计合成2对特异性引物和2种不同荧光基团标记的TaqMan探针，建立了一种双重荧光定量PCR检测方法，以达到在同一反应体系中同时定量检测GAstV Ⅰ和GAstV Ⅱ的目的。结果显示，GAstV Ⅰ和GAstV Ⅱ的最小检出量分别为43.3、6.49 copies·μL-1；重复试验的变异系数不超过0.5%；该方法对DPV、GPV、GTMUV、GRV、AIV （H9N2）等病毒核酸无交叉反应。综上表明，本研究建立的可鉴别GAstV Ⅰ和GAstV Ⅱ的双重荧光定量PCR方法灵敏度高、特异性强、重复性好。可用于临床GAstV Ⅰ和GAstV Ⅱ的快速鉴别诊断，也可用于两种基因型GAstV的定量分析。

来源：2023年第4期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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