畜牧兽医学报

作者：张成成, 孙嘉豪, 王秀玲, 张小荣, 吴艳涛

单位：扬州大学兽医学院, 江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心, 扬州 225009

关键词：PI3K/Akt信号通路,猪瘟病毒,Beclin1,蛋白互作,自噬

基金：国家自然科学基金（31902299）；江苏高校优势学科建设工程资助项目

为探究宿主蛋白Beclin1在猪瘟病毒（classical swine fever virus，CSFV）非结构蛋白NS5A激活细胞自噬反应过程中的作用及具体分子机制，本研究在感染CSFV及表达NS5A蛋白的ST细胞中，利用qRT-PCR方法检测Beclin1、PI3K/Akt通路相关因子表达变化情况；利用激光共聚焦、Co-IP及GST-pulldown等方法研究Beclin1与NS5A相互作用关系；通过在ST细胞中过表达或敲低Beclin1，研究其对CSFV复制的影响。结果表明，ST细胞感染猪瘟病毒或外源表达NS5A蛋白，Beclin1转录和蛋白表达水平均显著升高，且PI3K/Akt通路相关因子表达水平与之呈正相关。此外，CSFV NS5A蛋白与Beclin1蛋白在细胞中存在共定位且具有相互作用。最后，作者发现在细胞中过表达Beclin1，对CSFV复制起到明显促进作用；反之，利用siRNA敲低Beclin1后，抑制PI3K/Akt通路活化，CSFV增殖表现出明显抑制效应。以上结果表明，Beclin1蛋白对CSFV复制具有促进作用，其机制是通过与NS5A的相互作用调控PI3K/Akt通路来实现。

来源：2023年第2期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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