畜牧兽医学报

作者：贺显晶, 刘娇, 王志慧, 武瑞, 郭东华

单位：1. 黑龙江八一农垦大学动物科技学院, 大庆 163319;2. 佳木斯大学, 佳木斯 154007

关键词：牛源坏死梭杆菌,43KOMP,细菌黏附,上皮细胞

基金：黑龙江省自然科学基金项目（LH2022C073）；中国博士后科学基金第72批面上资助“地区专项支持计划”（2022MD723782）；黑龙江八一农垦大学三纵科研支持计划青年创新人才项目（ZRCQC202103）；黑龙江八一农垦大学博士启动金（XDB202203）

旨在明确牛源坏死梭杆菌43K OMP的黏附特性。将43K OMP基因克隆连接至pET-32a载体，转化入大肠杆菌BL21 DE3中，通过IPTG诱导进行原核表达，应用黏附试验、天然蛋白竞争试验、抗体抑制试验和蛋白酶水解试验，明确牛源坏死梭杆菌43K OMP的黏附性，同时将纯化的重组蛋白和提取的天然43K OMP与牛子宫内膜细胞和牛乳腺上皮细胞共孵育，观察43K OMP对细胞的黏附作用。结果显示：43K OMP基因克隆到pET-32a载体中，随后在大肠杆菌BL21 DE3以包涵体形式成功表达；携带重组质粒（H2019）的大肠杆菌经IPTG诱导后，与空载体对照相比，与宿主细胞的结合显著增强（P<0.05）；天然43K OMP与细胞共孵育后，黏附细胞的细菌数量显著降低（P<0.05）；H2019与43K OMP多抗或单抗预孵育后，显著降低黏附宿主细胞的细菌数量（P<0.05）；经不同浓度蛋白酶K处理H2019后，黏附细胞的细菌数量显著降低（P<0.05），且与蛋白酶K浓度呈现剂量依赖关系。同时，43K OMP天然蛋白和重组蛋白能黏附于牛子宫内膜细胞和乳腺上皮细胞表面。牛源坏死梭杆菌43K OMP能黏附宿主细胞，43K OMP作为一种黏附蛋白有助于牛源坏死梭杆菌对宿主细胞的黏附作用。

来源：2023年第2期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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