畜牧兽医学报

作者：黄婧洁, 李苗, 陈莹娴, 钟雅兰, 张婷婷, 姜廷超男, 李建成

单位：1. 中国农业大学, 动物源性食品安全检测技术北京市重点实验室, 北京 100193;2. 中国农业大学动物医学院, 北京 100193

关键词：免疫磁珠富集,氟喹诺酮类药物,单克隆抗体,间接竞争酶联免疫吸附试验(icELISA)

基金：国家重点研发计划（2018YFC1602301-4）；国家自然科学基金（31972738）

本研究旨在建立一种基于免疫磁珠进行分离、富集和净化前处理，检测鸡肉、鸡肝和鱼肉中氟喹诺酮类药物残留的间接竞争酶免疫吸附试验（indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assay，icELISA）的研究方法。通过对合成免疫磁珠及免疫磁珠净化过程中单克隆抗体添加量、偶联时间、缓冲液pH、抗原添加量、抗原捕获时间、温度及包被条件等进行优化，初步建立了基于免疫磁珠净化的icELISA检测方法。结果显示：1）在1 mg的磁珠中，沙拉沙星（sarafloxacin，SAR）单克隆抗体最佳偶联量为15 μg，偶联时间60 min，pH为4.4；2）最佳抗原添加量为1 ng·mL-1，捕获时间40 min，缓冲液为0.01 mol·L-1 PBS，IC50为0.73 ng·mL-1，线性范围为1.0~3.2 ng·mL-1；3）氟喹诺酮类药物在鸡肉、鸡肝、鱼肉的检测限均不超过1.33、2.17、2.31 μg·kg-1，回收率为76.83%~98.70%，批内变异系数批间变异系数均不超过15%，经验证，鸡肉样本检测结果与高效液相色谱法（HPLC）结果一致。结果表明，与传统仪器检测方法相比，该方法提高了检测氟喹诺酮类药物的简便性、选择性以及检测效率，为氟喹诺酮类药物的残留检测提供了新思路。

来源：2023年第2期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

查看畜牧兽医学报杂志2023年第2期