畜牧兽医学报

作者：王立斌, 王萌, 孙莹, 陈睿, 张甜甜, 黄振华, 张倩, 余四九, 潘阳阳

单位：1. 甘肃农业大学动物医学院, 兰州 730070;2. 甘肃省牛羊胚胎工程技术研究中心, 兰州 730070

关键词：雌激素,细胞自噬,细胞色素酶,卵母细胞成熟,胚胎发育

基金：国家自然科学基金(32160859)；甘肃省杰出青年基金项目(20JR10RA561)；陇原青年创新创业人才(团队)项目(2020-0624-RCC-0022)；甘肃农业大学伏羲青年英才基金(Gaufx-02Y10)；甘肃农业大学盛彤笙创新基金(GSAU-STS-2018-23)

旨在探索牦牛卵母细胞成熟过程中细胞色素P450芳香化酶(cytochrome P450arom,CYP19A1)对内源性雌激素(17β-estradiol,E2)分泌、卵母细胞自噬和后续胚胎发育能力的影响。本研究在牦牛卵丘卵母细胞复合体(cumulus-oocyte complexes,COCs)体外成熟过程中，分别用等体积生理盐水、最佳浓度E2(10-7 mol·L-1)、CYP19A1诱导剂黄曲霉毒素B1(aflatoxin B1,AFB1)、CYP19A1抑制剂双酚A (bisphenol A,BPA)处理，实时荧光定量PCR (real-time quantitative PCR,qRT-PCR)、Western blot和免疫荧光技术检测各组成熟COCs中CYP19A1表达水平，酶联免疫吸附方法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测诱导和抑制CYP19A1处理组牦牛成熟COCs培养液中E2水平；分析不同处理组COCs细胞自噬调控关键因子:自噬相关基因5(autophagy related gene 5,ATG5)、微管相关蛋白轻链3(microtubule associated protein light chain 3,LC3)和Bcl-2同源结构域蛋白(Bcl-2 homologous domain protein,BECLIN1)表达，比较不同处理组卵母细胞成熟率、孤雌激活胚胎卵裂率、以卵裂胚胎数为基数的囊胚率。结果显示，AFB1处理组COCs中CYP19A1的表达水平上调，内源性E2分泌增加，自噬相关因子ATG5、BECLIN1和LC3表达水平增加，且与对照组差异均显著(P0.05)。研究表明，牦牛COCs成熟过程中CYP19A1上调内源性E2水平，其上调的E2与外源性E2生理功能具有相似性，均可诱导细胞自噬发生，提升早期卵母细胞发育能力，结果为深入探索生殖激素调控哺乳动物卵母细胞成熟的分子机制提供了理论依据。

来源：2022年第12期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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