畜牧兽医学报

作者：周改静, 罗俊聪, 石正旺, 万颖, 杨波, 曹丽艳, 宋锐, 田宏, 郑海学

单位：中国农业科学院兰州兽医研究所 家畜疫病病原生物学国家重点实验室 OIE/国家口蹄疫参考实验室, 兰州 730046

关键词：非洲猪瘟病毒,p30蛋白,单克隆抗体,阻断ELISA

基金：广东省重点领域研发计划资助(2019B020211003)；科技重大专项计划(21ZD3NA001)； 所级基本科研业务费优秀青年科技人才项目(1610312021009)

为建立检测非洲猪瘟病毒(ASFV)抗体的阻断ELISA方法，本研究利用原核表达的ASFV p30重组蛋白免疫BALB/c小鼠制备单克隆抗体。以重组p30蛋白作为包被抗原，以辣根过氧化物酶(HRP)标记的p30单克隆抗体作为检测抗体，经条件优化，建立了一种检测ASFV抗体的阻断ELISA方法。ROC曲线分析显示，该方法最佳阻断率临界值为16.63%。该方法与CSFV、FMDV-O/A、PRRSV、PEDV、SVA的阳性血清均无交叉反应；最低能检出1∶128稀释的阳性血清；批内和批间变异系数(CV)均＜10%。用本方法与商品化试剂盒平行检测208份血清样品，Kappa值为0.96，表明具有高度一致性。上述结果表明，本研究建立的阻断ELISA方法具有较高的特异性和敏感性，可用于血清ASFV抗体的检测，为ASFV流行病学调查及猪群疫情监控提供技术支持。

来源：2022年第12期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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