畜牧兽医学报

作者：尹艳玲, 黄爽, 姚倩, 吴江平, 郭浩晨, 杨新, 宋军科, 赵光辉

单位：1. 西北农林科技大学动物医学院, 杨凌 712100;2. 重庆三峡职业学院, 重庆 404155

关键词：微小隐孢子虫,circRNA,ciRS-7/miR-219a-5p轴,自噬,增殖

基金：国家自然科学基金面上项目（32072890）；中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学实验室开放基金（SKLVEB2020KFKT015）

旨在探究环状RNA ciRS-7靶向miR-219a-5p影响微小隐孢子虫（Cryptosporidium parvum）在HCT-8细胞中增殖的作用机制。以C.parvum感染HCT-8细胞为研究模型，利用Western blot检测HCT-8细胞中的自噬蛋白LC3B-II和p62的表达情况；利用qRT-PCR和双荧光素酶报告基因试验检测和验证ciRS-7与miR-219a-5p的靶向关系，利用qRT-PCR检测HCT-8细胞中C.parvum的荷虫量（C.parvum hsp70基因的mRNA水平）。结果显示：C.parvum感染诱导HCT-8细胞中LC3B-II和p62的蛋白质表达水平在感染后8、12、24、36和48 h显著上调；过表达ciRS-7显著抑制了C.parvum感染细胞中LC3B-II的蛋白质表达水平，但升高了p62的蛋白质表达水平，而干扰ciRS-7表达的作用相反；C.parvum感染诱导HCT-8细胞中miR-219a-5p的显著下调表达，且ciRS-7可靶向调节miR-219a-5p的表达；miR-219a-5p mimics显著增加了C.parvum感染细胞中LC3B-II的蛋白质表达水平，但降低了p62的蛋白质表达水平，而miR-219a-5p inhibitor的作用相反；miR-219a-5p mimics可逆转过表达ciRS-7对C.parvum感染细胞中LC3B-II蛋白质表达的抑制和p62蛋白质表达的促进作用；miR-219a-5p mimics显著抑制了感染细胞中C.parvum hsp70基因的mRNA表达水平，而miR-219a-5p inhibitor的作用相反；miR-219a-5p mimics逆转了过表达ciRS-7对感染细胞中C.parvum hsp70基因的mRNA表达水平的上调作用。ciRS-7通过靶向miR-219a-5p抑制C.parvum感染诱发的HCT-8细胞自噬，进而促进C.parvum在HCT-8细胞中的增殖。

来源：2022年第11期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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